李微微 （黑龙江省七台河市畜牧兽医局 154699）

酿酒酵母是一种重要的模式生物[1]，具有广泛的科研应用价值。Nelson等研究表明,酵母的基因组中约有200多个基因与耐盐有关[6]。酿酒酵母细胞的生长、发育以及响应外界环境和压力变化都受到促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导途径的调控[7]。Warmka J等测量了在用渗透压处理前后的HOG1激酶的活性，结果显示Ptc1在酿酒酵母对环境的适应中起着重要作用[10]。本文研究目的是为了通过观察ptc1△缺失株在含有LiCL培养基中的生长情况，来考察PTC1基因在细胞壁完整性中的功能。

1 材料与方法

1.1 BY4741和ptc1△菌株复苏活化 取出冻存的酿酒酵母BY4741和ptc1△缺失株，用接种环在YPD培养基固体平板中划线，于30℃培养箱中培养。

1.2 不同浓度的培养基的制备 称取1.0g胰蛋白胨、2.0g葡萄糖、0.5g酵母抽提物、2.0g YPD琼脂粉于三角锥瓶中，加入预先配制的10ml 4M的LiCL溶液，再加入90ml蒸馏水溶解至清亮，即为含有终浓度为0.4M LiCL的YPD固体培养基。按照此种方法配制其他含不同浓度的LiCL YPD培养基。121℃高压灭菌20min后，无菌超净台中制备平板。

1.3 菌株划线培养 按照三线法，将BY4741和ptc1△缺失株在YPD+0.1M LiCl，YPD+0.2M LiCl，YPD+0.3M LiCl，YPD+0.4M LiCl平板上划线，同时以YPD平板做对照，划线后的平板倒置培养箱中，30℃下培养并观察记录结果。

2 结果

按照示意图所示，划线培养的菌株生长情况显示，ptc1△缺失株在含有0.1M和0.2M LiCl的YPD平板上的生长速度比野生型慢，但其生长情况大体上与野生型是一致的(图1、图2)。但是当LiCl的浓度上升至0.3M时ptc1△缺失株已经出现了明显的生长缺陷(图3)，而当浓度继续提高至0.4M时，这种浓度的LiCl对ptc1△缺失株已经有致死的毒作用(图4)。……