菌种滤纸保存法的应用
2013-08-15文德学顾雪梅王兴林胡忠惠兰兴翠贵州省黔西南州人民医院贵州兴义56400贵州省兴义市人民医院贵州兴义56400
检验医学与临床 2013年11期
文德学,顾雪梅,王兴林,胡忠惠,兰兴翠,李 莹(.贵州省黔西南州人民医院,贵州兴义 56400;.贵州省兴义市人民医院,贵州兴义 56400)
实验室质控工作需要保存各种质控菌株,保证质控菌株的稳定是做好质控工作的前提条件。保存菌种方法很多,根据不同的微生物菌株或不同的实验要求,可选用不同的保存方[1]。常见的有传代培养保存法、液体石蜡覆盖保存法、冷冻保存法、冷冻干燥保存法等[2-3]。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等许多非苛养菌质控菌株都是生长条件要求不高的细菌,通常用斜面琼脂培养基和半固体琼脂培养基覆盖石蜡油等方法均可很好保存,但是需要频繁移种以保证存活率,而反复传代又易导致细菌变异并造成菌种污染。一些常用的苛养质控菌株如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等在斜面琼脂培养基和半固体琼脂培养基上不能存活,没有条件的基层实验室难以保存这些苛养菌。在保存过程中必须使微生物的代谢处于相对静止状态,才能在一定时间内使其不发生变异又保持很好的活性。作者借鉴应用菌种滤纸保存法,基本满足上述3个条件,实验证明是一种经济有效、简便的菌种保存方法,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 自封袋:根据需要购买适宜大小的自封袋,也可使用试剂附送的自封袋。无菌EP管:将市售2cm直径EP管置于密闭的消毒盒内,经121℃高压蒸汽灭菌25min备用。无菌滤纸条:将市售滤纸用剪刀剪成约0.5cm×1.0cm滤纸条置于带塞的小试管内,经121℃高压蒸汽灭菌25min备用。……
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