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活猪携带猪瘟病毒检测方法比较

2013-08-14莫胜兰张步娴施开创屈素洁粟艳琼陆文俊

动物医学进展 2013年1期
关键词:检测方法

胡 杰,梁 媛,莫胜兰,张步娴,施开创,屈素洁,粟艳琼,陆文俊,苏 凯,李 军

(广西动物疫病预防控制中心,广西南宁530001)

猪瘟(Classical swine fever,CSF )是由黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)的猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、热性、接触性传染病,可感染各年龄的猪,一年四季都可流行,发病率和病死率均很高,由于其发生频繁,危害大,流传分布广泛,至今仍是世界防控的主要动物疫病之一。CSFV的检测方法包括常规病毒分离鉴定、兔体交互免疫试验、ELISA、荧光抗体染色法和RT-PCR等,特别是随着分子生物学技术的发展,对CSFV的检测方法发展很快,出现了套式PCR、一步法RT-PCR、多重RT-PCR、实时荧光定量PCR等方法[1-8],但这些方法在基层很难大面积推广应用,尤其是养殖企业在人员、设备、技术等方面存在着较大差异,还是倾向于使用荧光抗体法、ELISA等快速、简单易操作的检测技术。这些方法在猪瘟的诊断上各有优缺点,但各方法间的具体差异没有详细资料,CSFV检测方法进行比较的资料有桂祎等[9]用RT-PCR与ELISA试验比较,张朝红等[10]用病毒分离鉴定、荧光抗体法、RT-PCR和夹心ELISA 4种方法检测23份病料的比较;王向鹏等[11]用病毒分离、胶体金免疫层析试纸条、抗原捕捉ELISA、RT-PCR、TaqMan荧光定量 RT-PCR(RT-qPCR)和反转录-环介导等温扩增(RTLAMP)等6种方法,分别对50份疑似猪瘟病料中的CSFV进行检测;袁雪梅等建立了SYBR Green和TaqMan探针的两种荧光定量PCR检测方法,并进行比较[12]。上述资料多数是对病死猪进行检测,还未见有资料对活猪的不同样品间的差异进行比较。本试验对猪的全血、血清、扁桃体和精液4种不同样品用CSFV糖蛋白ErnsELISA、RT-PCR、CSFV抗原ELISA、荧光抗体染色法4种方法进行检测比较,观察不同样品的检测差异及不种方法之间的复合性、重复性等特性。……

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