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非洲猪瘟病毒VP73蛋白在昆虫细胞中的表达与间接ELISA方法的建立

2013-08-14曾少灵廖立珊唐金明杨俊兴阮周曦张彩虹曹琛福吕建强秦智锋林庆燕叶弈优谢晓露花群义

动物医学进展 2013年1期
关键词:血清检测

曾少灵,廖立珊,唐金明,杨俊兴,阮周曦,张彩虹,曹琛福,吕建强,秦智锋,林庆燕,孙 洁,叶弈优,谢晓露,花群义*

(1.深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东深圳518045;2.深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室,广东深圳518045)

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种急性、高度接触传染性疾病。ASFV是一种虫媒性DNA病毒,仅有一个血清型,但有多个毒力差别的病毒株[1]。非洲猪瘟临床症状是高热、皮肤发绀、内脏器官严重出血、呼吸障碍、神经症状,病程短,病死率高,对养猪业危害很大,可造成毁灭性的严重后果,受到世界各国的高度重视[1]。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,在我国则列为一类动物疫病[2]。

1921年,ASF在肯尼亚被首次发现,此后在非洲、欧洲和美洲等地的数10个国家发生和流行,由于非洲国家部分地区的社会动乱和缺少疫病上报制度,目前ASF流行的实际状况比上报的信息可能要严重得多[1-3]。OIE疫情公告中,俄罗斯自2011年以来几乎每个月均有暴发ASF疫情,每次暴发均导致上万头猪死亡或被扑杀,对猪养殖业造成了重大损失[4-5],同时对包括我国在内的与其接壤的周边国家和地区构成了严重威胁,对我国防控ASF的传入敲响了警钟[6]。

ASFV VP73基因全长1 188bp,编码的VP73蛋白是ASFV的主要抗原性结构蛋白,能够诱导机体产生中和抗体,且抗原性极为稳定,目前常被用作ELISA和Western blot检测ASFV血清抗体的主要抗原[1]。我国目前未发现ASF,作为防控监测使用的商业检测试剂盒基本上需从国外引进,检测技术依赖国外,检测成本昂贵,试剂购置周期长,一定程度上限制了我国监测ASF的力度和效果。……

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