周正茂 李育霞

反定型微板法在疾病预防控制中心的应用

周正茂 李育霞

保证反定型微板法在实际工作中顺利进行，并不断总结出血型误判的原因，以便在血型鉴定中引起重视，保证检测结果准确判读，提高输血安全系数。

反定型；微板法；血型误判；血型鉴定

1 材料与方法

1.1 仪器STAR全自动加样处理机，KUBOTA-4000平板离心机，上海无相微型振荡器，帝肯SUNRISE酶标仪，ITWELL实验室软件，96孔U型板，手工加样器。

1.2 试剂国家批准使用的反定血型试剂（上海血液生物医药有限责任公司-国食药监械准字2011第3400169号）。

1.3 操作方法

1.3.1 加样品（STAR加样）

1.3.1.1 在STAR软件上添加了XF1-48、XF49-96、O细胞检测加样程序的编辑，包括板的布局SA、SB位置从上到下重复一次的液体SAMPLE的加样，编号分别为1-48、49-96、1-96，加样量设定为40μl（血清和血球试剂），无预稀释液体的加入，无对照空加入，质控手工加入。

1.3.1.2 进行加样通道1000μl容量的核查，保证A、B、O三种血球凝集实验所需标本量的添加在整个1000μl允许范围内。

1.3.1.3 定义实验微板顺序，分别将反定型三块微板定义为XF年月日01、XF年月日02、XF年月日03。

1.3.2 加试剂用手工加样器在第一、第二（1-48、49-96）块板上手工加入等量的A、B血球试剂，在第三（1-96）块板上手工加入等量的O血球试剂。

1.3.3 离心KUBOTA-4000离心机有试管和微板两种离心轴，在进行此种血型操作时需要用微板离心轴进行血型微板的离心。KUBOTA-4000离心机设定1000转/min，离心时间为2min。血型微板要加盖后进行离心以防止外溅。

1.3.4 振荡振荡悬浮温度37℃，1000r/min，振荡2min取出静置5～10min。

1.3.5 判读借助ITSWELL实验室软件进行判读。读取规则为主波长620nm；振动强度为弱；……