程清洲 瞿永华 周 威 段 华

武汉工业学院医学技术与护理学院，湖北 武汉 430023

糖尿病 (diabetes)是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，是当今严重危害人类健康的三大疾病之一，目前难以有效防治［1］。近年来，国内外学者都对蜂胶在糖尿病预防及治疗方面的应用进行了探索，并取得了一定进展。蜂胶是天然保健食品，素有“紫色黄金”之称，具有活化细胞、促进组织再生、修复病损的胰岛细胞和组织、降低血糖等功能［2］。糖尿病患者长期服用中药或西药容易因副作用导致其他器官造成损害，因此，无毒副作用的蜂胶日渐被看好。本课题在蜂胶调节血糖，预防和治疗糖尿病方面进行了探究，为蜂胶核心成分的研究开发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 链脲佐菌素 (Streptozotocin，STZ)(Sigma－s0130);安稳血糖测试仪及试纸条 (长沙三诺生物传感技术有限公司)。

1.2 蜂胶提取物及用量准备 本实验用蜂胶于2012年5月采自湖北省神家架林区，经武汉工业学院生物及制药工程学院陈平教授鉴定为蜂胶，由武汉市小蜜蜂有限公司提供，购自神农架玉泉绿色产品有限公司。蜂胶提取物用醇法提取［3］，将蜂胶提取物灌胃前配制成小鼠的小、中、高剂量浓度，加吐温－80助溶。4℃低温保存，备用。药物小、中、高给药组的给药剂量分别为30mg/kg、60mg/kg、90mg/kg。灌胃溶液浓度分别为 0.21mg/m l、0.42mg/ml、0.84mg/ml，每天灌胃两次，每次0.5ml。空白组和模型组灌胃相应体积的生理盐水。灌胃前摇匀，连续灌胃30天。

1.3 动物模型的制作及分组、处理 实验用KM小鼠购自华中科技大学同济医学院实验动物中心，SPF级，体重(20±2)g，雌雄各半许可证号:SCXK(鄂)2010－0009。小鼠1型糖尿病 (TypeⅠDiabetes Mellitus，T1DM)动物模型的制作为:采用链脲佐菌素制模。方法为:注射时用柠檬酸缓冲液以1%的浓度溶解STZ，按200mg/kg腹腔注射相应的STZ，在30分钟内注射完毕。72h后测禁食12h空腹血糖。选取血糖值在16.7mmol/L以上为适用鼠。将其分为以下四组:模型组、药物低、中、高剂量组。空白组为:正常小鼠，常规饲喂。所有实验动物均食用全价混合饲料，自由摄食和取水。普通饲料适应性喂养2周后，按以上方法连续灌胃30天。其间分别测空腹血糖 (12h禁食不禁水)和餐后血糖 (自由摄食2h后)。

1.4 统计学处理 采用SPSS软件15.0版统计分析，各指标以±s表示，多组间样本均数比较采用方差分析。

2 结果

各组小鼠饲养30天，其间第15天和30天，采用尾静脉取血，用安稳血糖测试仪及试纸条分别测得各组小鼠空腹血糖和餐后血糖值，数据如表1所示。

从表1可见，正常组与模型组比较，0天、15天和30天模型组小鼠血糖持续较高，差异有显著性 (P＜0.01)，说明本实验链脲佐菌素组可作为糖尿病模型组。药物组低、中、高各剂量组小鼠血糖明显降低，均低于糖尿病血糖值范围，与模型组比较差异显著 (P＜0.01)，但均接近正常上限水平;与正常组比较，血糖高于正常组，但接近正常组，均无显著差异。以上结果表明:蜂胶具有降低糖尿病小鼠血糖的作用。其用量达到一定剂量时均有明显降低血糖的作用，都能使血糖达到正常，但接近上限的水平。

表1 蜂胶对小鼠血糖的影响 (±s，n=10)

表1 蜂胶对小鼠血糖的影响 (±s，n=10)

注:0d为与正常组比较;其他均为与模型组比较;a P＜0.01，b P＜0.05。

组别 0d(空腹) 15d(空腹) 15d(餐后) 30d(空腹) 30d(餐后)正常组 5.01±2.83 5.22±2.56a 6.95±1.71a 5.42±2.13a 6.68±0.90a模型组 21.64±3.55a 20.60±3.15 23.04±4.32 21.90±1.91 25.12±2.92低剂量组 19.88±3.37a 5.28±0.68a 9.15±2.32a 6.18±1.89a 8.81±3.05a中剂量组 19.33±1.91a 6.79±2.04a 9.06±2.53a 6.92±3.09a 8.53±2.79a高剂量组 21.27±3.23a 7.84±2.04a 9.15±2.16a 7.73±2.17a 9.16±2.93a

3 讨论

STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用，能诱发许多小鼠等动物产生糖尿病，大剂量注射时，由于直接引起胰岛β细胞的广泛破坏，可造成T1DM。本实验过程中运用STZ制造T1DM小鼠模型，是一种成熟的动物糖尿病模型制作方法。

蜂胶是世界各国公认安全的纯天然保健食品，蜂胶的产地会影响其活性成分，这一差异也直接导致了各地区蜂胶降糖作用的差异［4－6］。本实验用鄂西神农架地区蜂胶提取物小、中、高剂量均能有效地降低糖尿病小鼠血糖浓度

至或接近正常值。尽管与空白组大鼠血糖有一定的差别，但其防治糖尿病的作用是明显有效的。

T1DM是一种自体免疫疾病 (Autoimmune Disease)。患者的免疫系统对自身分泌胰岛素的胰岛β细胞(pancreatic beta cells)作出攻击，导致胰岛素分泌不足。蜂胶具有增强免疫功能的作用，这可能是其发挥降血糖的主要作用机制之一。蜂胶能强化免疫系统，增强免疫细胞活力，增强人体抗病力与自愈力。国内外研究表明［7－8］，蜂胶能够增强免疫功能低下小鼠的抗体生成细胞功能，提高溶血素含量，增强单核吞噬细胞功能;蜂胶水溶物及蜂胶中的咖啡

酸和咖啡酸苯乙酯是蜂胶发挥免疫调节作用的活性物质等。说明蜂胶有促进和调节机体体液免疫功能的作用，并增加机体吞噬细胞的吞噬作用。主要作用机制之二是蜂胶的抗氧化作用:蜂胶中含有丰富的黄酮类、酚类、萜烯类化合物，具有很好的抗氧化性能，是公认的天然抗氧化剂，可清除自由基，保护细胞膜、增强细胞活力、调节器官组织功能［9］。此外，蜂胶对体内酶系的作用:蜂胶对体内糖代谢酶系的影响可能是其抑制餐后血糖升高的主要原因。蜂胶中丰富的常量和微量元素也发挥重要作用［10］:蜂胶中含量丰富的镁、铬、锌、镍、钾、磷、钴等化学元素对糖尿病的防治有特殊作用。镁参与胰岛β细胞的功能调节，可改善糖代谢指标;铬可以激活胰岛素，改善糖耐量;锌可以维持胰岛素的结构和功能;镍是胰岛素的辅酶成分;钾

是细胞液中的重要成分，并参与蛋白质、碳水化合物代谢，可防止糖尿病患者多种并发症发生;磷缺乏，会使胰岛素在细胞膜上结合异常;钴有防治糖尿病神经病变及改善红细胞变形能力，从而减少糖尿病缺血性血管病变等作用。

在目前降糖药物均有不同程度的问题存在的状况下，蜂胶作为一种具有明显降糖作用的天然保健食品，既克服了中药疗效缓慢的缺点，又不存在对患者身体的毒副作用。因此我们要深入研究蜂胶的有效核心成分，及其在防治糖尿病作用等系列功能的研究和开发，蜂胶复方制剂、中药配伍等在降血糖方面的显著疗效更值得我们深入探索，这也是未来蜂胶应用开发的突出发展方向。

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