miR-145对HepG2细胞中肿瘤干细胞增殖的影响
2013-07-01涛李国庆娟陈宏辉陈
何 涛李国庆* 谢 娟陈宏辉陈 汶
(1 南华大学附属第二医院消化科,湖南 衡阳 421001;2 南华大学医学院诊断学教研室,湖南 衡阳 421001)
miR-145对HepG2细胞中肿瘤干细胞增殖的影响
何 涛1李国庆1* 谢 娟2陈宏辉1陈 汶1
(1 南华大学附属第二医院消化科,湖南 衡阳 421001;2 南华大学医学院诊断学教研室,湖南 衡阳 421001)
目的 探讨HepG2细胞中miR-145与肝癌干细胞之间的关系及可能的分子机制,为肝癌诊治探索一条新方法。方法 分别以siRNA-NC-FAM和shRNA-GFP为转染物,倒置荧光显微镜下观察用脂质体Lipofectamine 2000转染的效率,进行转染效率评价。结果 中剂量的siRNA oligo转染 HepG2细胞效果较好;各实验对照组相比,miR-145-5p模拟物转染组的miR-145表达明显上调;过表达miR-145抑制HepG2细胞生长;转染后48h模拟物转染组过表达的miR-145可明显降低OCT4蛋白水平及干细胞标志物CD90 mRNA的表达。结论 以Lipofectamin 2000为转染试剂,使用中剂量的siRNA oligo转染HepG2细胞效果优于低、高剂量,同时明显优于转染shRNA者;过表达miR-145可抑制HepG2细胞株增殖;miR-145可能通过下调OCT4基因表达抑制HepG2细胞株中肿瘤干细胞的增殖,是一种潜在的肝癌“保护性”miRNA。
miR-145;肝癌;Oct4基因;干细胞
MicroRNAs(miRNAs)是生物进化上高度保守的一类非编码小RNA,研究表明其参与细胞活动的各方面,包括分化、生长、代谢、增殖、凋亡、肿瘤生成等[1]。miRNA主要参与基因的转录后调控,通过与靶基因的mRNA完全或者不完全的互补配对而起到促进目标mRNA降解或者抑制蛋白翻译的作用[2]。研究显示miRNA与肝癌的转移、复发及预后关系密切[3-4]。胡瑧等[5]研究证实miR-145在肝癌HepG2细胞系中的表达水平低于正常肝组织。张帅等[6]研究发现miR-145通过下调Oct4的表达从而抑制肺腺癌A549细胞株中干细胞的增殖。……
