王彩凤* 邱燕玲 刁诗光 蒋 英 李伟贤 马占忠 刘绍华

（广东省韶关市粤北人民医院，广东 韶关 8101569）

儿童哮喘IL-4、IFN-γ与总IgE关系的研究

王彩凤* 邱燕玲 刁诗光 蒋 英 李伟贤 马占忠 刘绍华

（广东省韶关市粤北人民医院，广东 韶关 8101569）

目的 考察儿童哮喘 IL-4、IFN-γ 与总 IgE 的相关性。方法 采用了双抗体夹心 ELISA 法、免疫比浊法对 60 例支气管哮喘儿童 (观察组 )与 30 例无气喘与特异体质住院的支气管炎、支气管肺炎儿童 (对照组 )的血清 IL-4、IFN-γ 与总 IgE 含量进行测定并分析。结果 观察组IL-4、总 IgE 水平显著高于对照组 (P ＜ 0.01)，而 IFN-γ 水平显著低于对照组 (P ＜ 0.01)，组间差异具有统计学意义，直线回归分析结果显示，观察组 IL-4 与总 IgE 表 现为 正相 关 (r=0.884，P ＜ 0.01)，IFN-γ 与总 IgE 表 现为 负相 关 (r=0.759，P ＜ 0.01)；对照组 IL-4 与总 IgE 表现为正相关 (r=0.887，P ＜ 0.01)，IFN-γ 与总 IgE 表现为负相关 (r=0.741，P ＜ 0.01)。结论 早期就儿童血清 IL-4、IFN-γ 以及 IgE 水平实施监测对防治无气喘与特异体质的支气管炎、支气管肺炎向哮喘发展具有十分重要的临床意义，而通过研发改善 Th1/Th2平衡的新型免疫调节剂是治疗儿童哮喘的可靠方法。

支气管哮喘；IL-4；IFN-γ；IgE；儿童

当代医学普遍认为，哮喘的基本临床病理特征为患者表现有慢性的气道炎症和气道高反应性[1]。近些年来，随着分子生物学以及分子免疫学的不断发展，越来越多的试验研究和临床实践已基本证明，患者机体出现免疫紊乱是引发哮喘的重要诱因，而在Th0分化的过程中，出现Th1及Th2的失衡则是最关键的免疫异常变化，也有相关资料显示，Th1/Th2细胞在数量、活化以及功能等方面的比例失衡，包括细胞网络因子的失衡是促发哮喘并发作的直接因素[2]。白细胞介质素-4（IL-4）与r干扰素（IFN-γ）是Th1和Th2细胞分泌的两种重要细胞因子，可在哮喘病的发生发展过程中相互影响或制约，并共同调节免疫球蛋白E（IgE）的合成转换，最终可形成以IgE依赖为主要特征的迟发型哮喘反应[3]。此外，大量临床资料显示，多数普通支气管肺炎患儿同样也存在血清总IgE升高的情况，且在愈后有较高几率出现反复喘息甚至升级为支气管哮喘，因此有学者认为针对普通支气管炎采取积极有效的治疗也是预防支气管哮喘发生的重要途径[4]。为进一步探讨IL-4、IFN-γ与总IgE的关系，以期为临床儿童哮喘患者的防治提供新思路与方法，为制订儿童哮喘防治策略提供理论依据，本研究分别采用了双抗体夹心ELISA法、免疫比浊法对60例支气管哮喘儿童与30例无气喘与特异体质住院的支气管炎、支气管肺炎儿童的血清IL-4、IFN-γ与总IgE含量进行测定，一并作出分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究中60例支气管哮喘患儿与30例无气喘与特异体质住院的支气管炎、支气管肺炎患儿均系随机选取于2011年1月至2012年9月期间我院于收治的患者，并分别作为观察组和对照组。其中，观察组包括男患儿34例，女患儿26例，年龄2～14岁，平均年龄3岁，本组患儿均符合儿童支气管哮喘诊断标准。对照组30例包括男患儿19例，女患儿11例，年龄1～9岁，平均年龄3.5岁，本组患者均符合普通支气管炎和支气管肺炎的诊断标准。

1.2 排除标准

有以下情况者均不纳入本研究病例：①合并有严重肝肾疾病、传染疾病、原发性结核病、血液系统相关疾病、免疫性疾病、寄生虫疾病、皮肤疾病以及除毛细支气管炎和哮喘意外的其他呼吸系统疾病；②先天支气管或肺功能发育不全、胃食道返流造成支气管存有异物；③在患儿发病的前两个月内，有采用糖皮质激素以及其他非糖皮质激素类抗炎药、白三烯调节剂以及抗组胺抗过敏类药物进行相关治疗等。

1.3 方法

1.3.1 血清样本采集

观察组与对照组患儿在入院后24h内应用采血管各采集2mL静脉血样本，将所有样本在室温（20～25℃）条件下放置60min后，以4000rpm进行离分处理15min，离心完成后取得上层血清分装于Eppendorf管中，最后将样本储存于温度为-70℃的冰箱中保存作为本次实验样本待测，需要注意的是在样本保存期间，勿反复冻融。

1.3.2 血清IL-4、IFN-γ与IgE含量测定

采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行血清IL-4与IFN-γ的定量检测，应用仪器为美国雷博公司WellsanMk3酶标仪；血清总IgE的测定采用免疫比浊法测定，Randx的试剂。

1.4 统计学方法

本研究所得数据采用SPSS13.0软件包处理并用（χ—±s）表示，计数资料采用χ2检验，比较以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 观察组与对照组IL-4、IFN-γ与总IgE检测结果

检测结果发现，观察组IL-4、总IgE水平显著高于对照组（P＜0.01），而IFN-γ水平显著低于对照组（P＜0.01），组间差异具有统计学意义。详见表1。

表1 观察组与对照组IL-4、IFN-γ与总IgE检测水平比较（χ—±s）

2.2 观察组与对照组IL-4、IFN-γ与总IgE的相关性

采用直线回归分析结果显示，观察组IL-4与总IgE表现为正相关（r=0.884，P＜0.01），IFN-γ与总IgE表现为负相关（r=0.759，P＜0.01）；对照组IL-4与总IgE表现为正相关（r=0.887，P＜0.01），IFN-γ与总IgE表现为负相关（r=0.741，P＜0.01）。

3 讨 论

无气喘与特异体质住院的支气管炎、支气管肺炎是儿科临床的常见呼吸道疾病，大量研究资料显示，该疾病多数情况下是由细菌和病毒所引发，且临床发现至少有1/5的婴儿在出生后会因此类细菌或病毒的感染而发生喘息性疾病，且很多时候还会在治愈后出现反复发作的情况，而这当中又有16%的患儿会发展成为哮喘，可对患儿的健康构成严重的威胁，故在临床上，深入探讨因细菌和病毒感染而引发的无气喘与特异体质住院的支气管炎、支气管肺炎与哮喘的关系愈发成为备受关注的热门课题，通过了解并掌握二者之间的关联因素有望为儿童哮喘的防治提供更科学的依据[5]。

支气管哮喘是一种诱发型慢性气道炎症，其诱发介质主要由Eos和MC以及T淋巴细胞等效应细胞所分泌，也就是说，支气管哮喘是基于多种细胞相互作用的结果[6]。其中，对哮喘发生起着至关重要作用的物质为活化的CD4+T淋巴细胞以及Eos、MC的聚集和分泌产生的毒性蛋白。CD4+T淋巴细胞在活化后，可促使多种细胞因子的分泌，这些细胞因子通常可根据其差异性分为Th1和Th2两个亚群。有研究显示，Th1和Th2两亚群比例以及功能的失衡形成了哮喘发作的主要病例机制，而具体的表现则是Th1细胞亚群出现功能下降、Th2细胞亚群出现功能亢进的情况[7]。从本研究结果也可以看出，观察组患有支气管哮喘的患儿的血清IL-4水平较对照组显著升高（P＜0.01），而IFN-γ水平较对照组显著下降（P＜0.01），差异具有统计学意义，提示支气管哮喘患儿血清IL-4的Th2细胞分泌旺盛，而Th1细胞则相对分泌较少，进一步佐证了Th1和Th2的不平衡所引发IL-4与IFN-γ的不平衡可视为导致哮喘发生的重要因素。与此同时，在大量存在IL-4的情况下，CD4+T细胞会不断向Th2细胞转变，而新生成的Th2细胞又可继续分泌更多的IL-4，经过这般循环的过程，血清IL-4水平自然会持续升高，由此便可解释为何支气管哮喘患儿会出现IL-4升高的现象。继而，在IL-4升高的情况下，B细胞及肥大细胞的增殖与分化加剧，可促进B细胞分泌IgE抗体和表达亲和力IgE受体，因此IgE水平会同时得以提升，亦即IL-4水平与IgE水平表现为正相关（r=0.884，P＜0.01）。同时，正是因为高水平的IL-4导致Th2细胞成为了CD4+T细胞的主要分化产物，所以Th1细胞会相对偏少，其分泌产物IFN-γ自然也会随之减少，而IFN-γ不但具有抑制Th2细胞形成降低IL-4分泌的作用，同时也能在很大程度上阻碍IL-4诱导B细胞合成IgE抗体，故在哮喘发病的过程中具有重要的保护作用[8]。本次研究结果显示，在血清IgE水平居高的同时，IFN-γ水平显著偏低，二者为负相关（r=0.759，P＜0.01），提示IFN-γ水平较低为Th1细胞数量较少所致。回头再分析无气喘与特异体质住院的支气管炎、支气管肺炎患儿，进过查阅资料，其IL-4与IgE水平均较正常儿童有所增加，IFN-γ较正常儿童有所下降，但增加或下降的程度均不及支气管哮喘患儿，但与观察组情况相似，其IgE水平与IL-4呈正相关（r=0.887，P＜0.01），与IFN-γ呈负相关（r=0.741，P＜0.01）。

综上所述，细胞因子IL-4、IFN-γ在儿童哮喘与普通支气管炎、支气管肺炎发病的过程中，均分别与IgE水平成正相关与负相关，两种疾病均存在细胞因子失衡的情况，具有相似的免疫学发病机制，且普通支气管炎、支气管肺炎可当作部分支气管哮喘疾病的首次发作，早期就儿童血清IL-4、IFN-γ以及IgE水平实施监测对防治毛细支气管炎向哮喘发展具有十分重要的临床意义，而通过研发改善Th1/Th2平衡的新型免疫调节剂是治疗儿童哮喘的可靠方法。

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[2]宋煜勋,魏梅,周红.IL 24及其受体在哮喘中的作用[J].中国水电医学,2008(5): 613.

[3]吕国军,柳春.IFN-γ/IL-4失衡在支气管哮喘发病中的作用治疗新进展[J].实用中医内科杂志,2004,18(2):145.

[4]魏晋勇,江明,华田路.哮喘与白细胞介素-4和γ-干扰素的关系[J].中国煤炭工业医学杂志,2000,3(12):48.

[5]许力军,唐颖,华树成,等.丙酸氟替卡松/沙美特罗联合孟鲁司特钠对哮喘患者细胞因子及肺功能的影响[J].临床荟萃,2009, 24(4) : 933.

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[7]Perk ins C.Supp ressive effect of IL 24 on IL 213-induced genes in mouse lung[J].J Immunol,2005,174(8) : 4630.

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Asthma in Children IL-4, IFN-γ and Total IgE Relation Research

WANG Cai-feng*, QIU Yan-ling, DIAO Shi-guang, JIANG Ying, LI Wei-xian, MA Zhan-zhong, LIU Shao-hua
(Yuebei People′s Hospital of Shaoguan, Shaoguan 8101569, China)

ObjectiveTo investigate childhood asthma IL-4, IFN-γ and total IgE correlation.MethodUsing double antibody sandwich ELISA assay, immune turbidimetry on 60 cases of bronchial asthma in children ( observation group) and 30 cases of normal bronchial pneumonia in children ( control group) . Serum IL-4, IFN-γ and total IgE concentrations were determined and analyzed.ResultsIn the observation group, IL-4, total IgE levels were significantly higher than that in control group (P＜0.01), and the levels of IFN-γ were significantly lower than those in control group (P＜0.01), difference has statistical significance, linear regression analysis showed that, the observation group IL-4 and total IgE showed positive correlation (r=0.884, P＜0.01), IFN-γ total IgE showed negative correlation (r=0.759, P＜0.01); the control group IL-4 and total IgE showed positive correlation (r=0.887, P＜0.01), IFN-γ and total IgE showed negative correlation (r=0.741, P ＜0.01).ConclusionEarly children's serum IL-4, IFN-γ and IgE level implementation of monitoring on the prevention and treatment of bronchiolitis to asthma development has very important clinical significance, and through the development of improved Th1/Th2 equilibrium model of immune modulators is a reliable method for the treatment of asthma in children.

Bronchial asthma; IL-4; IFN-γ; IgE; Children

R562.2+5

：B

：1671-8194（2013）02-0065-02

广东省韶关市医药卫生科研计划项目（No.Y11008）

*通讯作者：E-mail：isillycati@yahoo.com