韩 冬

高效液相色谱法测定芪芍抗毒颗粒中黄芪甲苷的含量

韩 冬

目的芪芍抗毒颗粒中黄芪甲苷的含量测定，建立制剂质量标准。方法与结果在0.9～10.8μg范围内呈线性关系，回归方程Y=5.5969+1.7274X，r=0.9999；精密RSD为3.82%；稳定性RSD为3.69%；重现性黄芪甲苷含量（mg/g）X=0.0974 RSD=4.14%；回收率黄芪甲苷X=98.47%，RSD=0.59%。结论芪芍抗毒颗粒中黄芪甲苷含量测定方法稳定，可作为芪芍抗毒颗粒制剂质量标准控制指标。

芪芍抗毒颗粒；黄芪甲苷；高效液相色谱法；含量测定

芪芍抗毒颗粒是由黄芪、芍药等多味中药组成。黄芪为方中君药，黄芪甲苷为其主要成分，药理研究证明黄芪甲苷具有扶正抗衰、抗病毒、增强免疫功能的作用[1]。黄芪中含有黄芪多糖、黄芪甲苷和多种氨基酸[2]。采用高效液相色谱法对黄芪甲苷的含量进行测定[3]，已建立可控的芪芍抗毒颗粒质量标准。

1 材料

1.1 仪器LC-10A高效液相色谱仪（岛津）；电子分析天平（梅特勒）。

1.2 试剂甲醇，乙腈为色谱纯；其余试剂均为分析纯。

1.3 试药对照品黄芪甲苷购于中国药品生物制品检定所。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备取本品10g，精密称定，加甲醇100ml，加热回流1小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水50ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇等体积萃取3次，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2 色谱分析条件高效液相色谱仪：岛津LC-10A。色谱柱：岛津ODS-C18柱（4.6×250mm，5μm）流动相：以乙腈：水（32：68）为流动相；流速：1.0ml/min；检测器：蒸发光检测器

2.3 对照品溶液的制备对照品制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.45mg的溶液，即得。

2.4 测定方法分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，用外标两点法对数方程计算，即得。

2.5 线性关系考察线性关系的考察和标准曲线：取黄芪甲苷对照品制成0.45mg/ml的标准溶液，分别精密吸取2、6、12、18、24μl，注入高效液相色谱仪，测定色谱蜂峰面积，作浓度-积分面积的线性关系曲线，进样量在0.9～10.8μg范围内呈线性关 系，回归方程Y=5.5969+1.7274X，R2=0.9999。

表1 黄芪甲苷线性考察数据

图1 黄芪甲苷线性图

2.6 精密度试验精密吸取对照品溶液10ul，重复进样5次，测定色谱峰峰面积，计算，黄芪甲苷峰面积平均值为2449349，RSD为3.82%。结果见表2。

表2 精密度测定

2.7 稳定性试验精密吸取供试品溶液10ul，每隔2小时进一针，测定色谱峰峰面积，计算，黄芪甲苷峰面积平均值为2403152.2，RSD为3.69%。结果见表3。

表3 稳定性测定

2.8 重现性试验取同一样品，均分5份，精密称定，分别按本品质量标准含量测定项下操作，测定，计算，结果见表4。

表4 重现性试验

2.9 回收率实验取已知黄芪甲苷含量的样品（含量为0.0974mg/g）5g，共5份，精密称定，分别精密加入黄芪甲苷约2.0mg，按本品质量标准检测测定项下操作测定，计算回收率，结果见表5。

表5 回收率试验(n=5)

2.10样品含量测定数据及含量限度按本品质量标准含量测定项下的操作方法，测定三批样品，每批测定2次，取其均值，列入表6。

表6 样品含量测定结果

3 讨论

通过实验结果表明，黄芪甲苷含量测定方法稳定，制剂中黄芪甲苷含量可控，可用于芪芍抗毒颗粒质量控制指标，为大工业生产具有指导意义。

[1] 贾淑琴.黄芪的化学成分、药理和临床研究[J].天津药学,1994, 6(4)：48-48.

[2] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海：上海人民出版社,1997：2037-2037.

[3] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(Ⅰ部)[S].北京：化学化工出版社,2010：283-284.

HighPerformance Liquid Chromatography Astragaloside Content of Qishaokangdukeli

Han Dong

ObjectiveThe determination of content in astragaloside of Qishaokangdukeli, establish the quality standards of preparations.Methods or ResultsA linear relationship wihin the range of 0.9-10.8μg, regression equation Y=5.5969+1.7274X, r=0.9999; accurate RSD is 3.82%;stability RSD is 3.69%; the reproducibility astragaloside content (mg/g) X=0.0974, RSD=4.14%; Recoveries of astragaloside X=98.47%, RSD=0.59%.ConclusionThe stable in determination of astragaloside of Qishaokangdukeli,can be used as preparation quality standards control indicators in Qishaokangdukeli.

Qishaokangdukeli; Astragaloside; HighPerformance Liquid Chromatography; Determination of content

R917

A

1673-5846(2013)06-0198-02

吉林省中研医院药剂科，吉林长春 130021