滨州医学院附属医院儿科，山东 滨州 256603

靶向沉默HOXA9基因对U937细胞体内外增殖的影响

贾秀红 张艳君 李建厂

滨州医学院附属医院儿科，山东 滨州 256603

背景与目的：多数急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia，AML)患者高表达同源盒A9(homeoboxA9，HOXA9)，而HOXA9高表达与患者预后差有关。本研究探讨慢病毒载体介导shRNA(short harpin RNA，siRNA前体)靶向沉默HOXA9基因对人急性单核白血病细胞株U937细胞在体内外增殖的影响。方法：将U937细胞分为干扰组、阴性对照组、空白对照组，转染效率＞90%时，经蛋白质印迹法(Western blot)测定对HOXA9基因的沉默作用；FCM检测各组细胞周期的变化；绘制各组细胞生长曲线。将32只裸鼠腹腔接种U937细胞，随机分为4组，即阴性对照组、干扰组、阴性对照联合VCR组、干扰联合VCR组，每组8只，每只裸鼠腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg，连续4 d。1周后向阴性对照联合VCR组和干扰联合VCR组裸鼠的腹腔注射VCR 0.5 mg/kg，每周1次，连续4周。观察各组裸鼠的生存期。结果：流式细胞仪测得慢病毒对U937细胞的转染效率＞90%，干扰组HOXA9的蛋白表达水平为46.56%±3.54%，较空白对照组和阴性对照组均下降(P＜0.05)。干扰组细胞被阻滞于G0/G1期，其增殖明显受到抑制。慢病毒干扰HOXA9基因的表达联合VCR可显著延长裸鼠的生存期。结论：以慢病毒载体介导shRNA靶向沉默HOXA9基因表达，可明显抑制U937细胞在裸鼠体内外的增殖。

同源盒A9；RNA干扰；U937细胞；白血病

同源盒A9(homeoboxA9，HOXA9)基因位于人类7号染色体短臂(7p15-p14)，其编码的转录因子对调节胚胎发育、细胞分化和机体造血起着至关重要的作用。80%的急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia，AML)患者高表达同源盒A9(homebox A9，HOXA9)基因，且高表达HOXA9基因的患者预后较差［1］。U937细……