牛黄解毒片中樟脑的定量分析

2013-06-06全维明李含春

中国现代药物应用 2013年1期

全维明李含春

牛黄解毒片是由人工牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草按《中国药典》2010年版规定工艺加工而成的中药成方制剂，收载于《中国药典》2010版一部。其功能是清热解毒。用于火热内盛，咽喉肿痛，牙龈肿痛，口舌生疮，目赤肿痛［1］。在处方中冰片具有开窍醒神，清热止痛。用于热病神昏、痉厥，中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，目赤，口疮，咽喉肿痛，耳道流脓。而在《中国药典》2010版一部中，对冰片中樟脑的含量做了限量规定［1］，所以在牛黄解毒片中测定樟脑的含量对评价牛黄解毒片的质量有一定的意义。在现有文献报道中，没有对牛黄解毒片中樟脑定量分析的报道，本文采用毛细管气相色谱法［2］，对牛黄解毒片中的樟脑进行含量测定，为牛黄解毒片的质量控制提供一种可行方法。

1 仪器与试药

浙江福立分析仪器有限公司GC9750气相色谱仪;FID检测器;PEG20000石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 m);梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司XS 205DU电子天平;樟脑对照品购自中国药品生物制品检定所(批号:110747-200507);牛黄解毒片样品由太极集团四川绵阳制药有限公司提供(批号:55110002、55110005、55110009)。阴性对照药材由乐山市龙马中药材公司提供，按《中国药典》2010版一部检验均符合标准规定;其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备精密称取樟脑对照品60.00 mg，置100 ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。

2.2 供试品溶液和阴性对照液制备取牛黄解毒片(批号:55110002)120片，除去糖衣(120片重为:60.2112 g)。研细，精密称取细粉4.5158 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯10 ml，精密称定重量;超声处理15 min，再精密称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，用0.45 m微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取处方量药品(除冰片外)，按标准规定工艺制成阴性对照品制剂，取阴性对照品制剂适量，研细，精密称取阴性对照品制剂4.5079 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入醋酸乙酯10 ml，精密称定重量;超声处理15 min，精密称定重量，再精密称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，用0.45 m微孔滤膜滤过，取续滤液作为阴性对照液溶液。

2.3 色谱条件 PEG20000石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 m)，柱温:140℃。载气N2;进样口温度180℃，流速1.2 ml/min;进样量:1 L，分流比15:1。FID检测器温度:180℃。

2.4 系统适应性实验精密量取对照品贮备液5 ml，置10 ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液照上述色谱条件分别进样，如图1。供试品溶液色谱图中有与对照品色谱图中樟脑色谱峰相对应的色谱峰，并且该色谱峰与其他色谱峰的分离度大于1.5，理论塔板数为40004;而阴性对照溶液无这一色谱峰。

2.5 线性关系精密量取樟脑对照品储备液1、2.5、4、5.5、7、8.5 ml，分别置10 ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取上述溶液各1 L注入气相色谱仪中，进行测定。以樟脑峰面积(A)与樟脑浓度(μg/ml)作回归曲线得Y=79.7867X+10.01256，r=0.9999(n=6)。结果表明，樟脑进样量在60～510ng范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验精密量取对照品贮备液5 ml，置10 ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件吸取上述溶液各1 L注入气相色谱仪中，进行测定。连续进样6次，结果樟脑的平均峰面积为23936，RSD为1.33%。

2.7 重现性试验精密称取2.2项下细粉散适量(约9片量)，共6份，分置6个置于具塞锥形瓶中，精加醋酸乙酯10 ml，精密称量;超声处理15 min，再精密称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，用0.45 m微孔滤膜滤过，用0.45 m微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别吸取上述溶液各1 L注入气相色谱仪中进行测定，结果樟脑平均峰面积(折算为称量为9片细粉重量的峰面积)为1070，RSD为1.33%。

2.8 稳定性试验取供试品溶液于0，2，4，6，8，12 h测定，结果表明樟脑峰面积RSD为1.83%，表明样品溶液在室温条件下12 h内稳定，能满足含量测定要求。

2.9 加样回收试验取牛黄解毒片(批号:55110002每片含樟脑0.149 mg)除去糖衣(120片重为:60.2112 g)，研细，精密称取细粉(约2 g)9份，分别置于10 ml量瓶中，精密加入樟脑对照品储备液0.60、0.75、0.90 ml，加乙酸乙酯适量，超声处理30 min，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。照上述色谱条件测定，樟脑加样回收结果见表Ⅰ。从表Ⅰ可以看出，在选定的分析条件下，样品加样回收率在97.2% ～99.5%之间，平均回收率为98.4%，RSD为0.8%，方法的准确度可以满足样品的测定要求。