陈瑞娇

（韶关学院 英东生命科学学院，广东 韶关512005）

芹菜（Apium graveolensL.）为伞型花科（Umbellifera）芹属二年生草本植物，又称为旱芹、药芹［1］.原产于地中海沿岸,在我国已有2000多年的栽培历史，全国各地均有栽培.芹菜富含维生素、矿物质、蛋白质等多种营养成分，而且茎叶中还含有芹菜甙、佛手甙内酯、挥发油等药用成分，具有降压利尿、增进食欲、健胃、防癌等多种药理功效［2］.目前,国内外对于芹菜染色体及核型的研究报道较少,何兴金［3］等研究了四川野生旱芹的染色体数目和核型，赵冬［4］等报道了中国芹品种铁杆芹的染色体核型，为更好地了解芹菜不同品种的核型,本研究拟对黄心芹品种进行染色体数目和核型分析,以期为后续的芹菜新品种选育及杂交育种中的亲本选配提供细胞遗传学资料.

1 材料和方法

1.1 材料

供试材料“黄心芹”购于韶关市第一市场种子销售店.

1.2 染色体标本制备及核型分析方法

种子在25℃培养箱中浸泡24 h后，均匀摆放在铺有2层湿滤纸的培养皿中,置于20℃培养箱培养，培养其间每天喷一次水.当根长达到0.5～1.0 cm时，于上午9:30左右剪下根尖，置于0.002 mol/L 8-羟基喹啉和0.1%秋水仙素的等量混合水溶液中17℃下预处理3 h；蒸馏水清洗2~3次后置新配置的卡诺氏固定液中,4℃条件下固定12～24 h；蒸馏水清洗2~3次后放入1 mol/L HCl中，60℃下恒温解离6~10 min；清洗2~3次后于蒸馏水中低渗10 min；用刀片切取约2 mm长的根尖滴加改良石碳酸品红染色10~15 min，常规压片镜检并统计染色体数.选择染色体形态清晰、分散较好的分裂相进行显微照相,核型分析按李懋学等［5］的标准,用Adobe Photoshop图片处理软件，进行染色体长度的测量、同源染色体的配对和排列.按照Levan等［6］的方法进行染色体类型分类，核型不对称系数用Arano［7］的方法计算,核型类型按Stebbins［8］的方法划分.

2 结果与分析

2.1 染色体数目

在本试验中,统计了30个染色体分散良好的细胞,其中28个细胞染色体数目为22条，占计数细胞总数的93.3%，因此确定黄心芹体细胞染色体数目为2n=22(见图1).各细胞的22条染色体均可配成11对同源染色体，表明均为二倍体，具有2个染色体组，染色体基数为n=11.

图1 芹菜细胞中期分裂相

图2 芹菜染色体核型图谱

2.2 芹菜的核型分析

芹菜的染色体参数见表1，核型图及核型模式图分别见图2，图3.

芹菜核型公式为 K(2n)=2x=2m+18st+2t.第 1、2、3、4、5、6、8、10、11 对为近端部着丝粒染色体；第 7 对为中部着丝粒染色体,第9对为端部着丝粒染色体.染色体的相对长度变化范围为6.58～10.90，臂比值变化范围在1.14～20.9之间.核型不对称系数为81.87%，不对称程度较高.最长染色体与最短染色体长度比为1.66,小于2:1的比值,且臂比值大于2的染色体为10对，占总数的91%，根据stebbins的核型分类标准，芹菜的核型类型为3A型.未发现次缢痕和B染色体.

表1 芹菜的染色体参数

图3 芹菜核型模式图

3 讨论

本研究表明，芹菜体细胞染色体数目2n=22，核型公式为K(2n)=2x=2m+18st+2t，核型类型为3A型.何兴金［3］等对四川野生旱芹的染色体数目和核型进行了研究，得出旱芹染色体数目为22，核型公式为2n=2x=22sm，染色体类型为4C型；赵冬［4］等对中国芹品种铁杆芹的染色体核型分析结果表明其染色体数亦为 22，核型公式为K(2n)=2x=22=6m+2sm+8st+6t，染色体类型为3B型.可见芹菜3个不同品种的染色体数均为2n=22，说明芹菜染色体数较为稳定.但是研究所得的核型公式和核型类型差异较大，通过分析原文数据，何兴金等所描述的旱芹最长染色体与最短染色体的比值为1.54，其臂比值大于2的染色体在整个染色体组中所占的比例为100%，按照Stebbins的核型分类标准，确定旱芹核型类型应属于4A型，从而证实何兴金等所得旱芹核型类型为4C型的结论不正确.不同的研究者所得的芹菜核型公式和核型类型存在差异，是否是所研究的的芹菜品种不同所致有待于进一步探讨.

［1］中国农业科学院蔬菜花卉研究所.中国蔬菜品种志［M］.北京:中国农业科技出版社,2001：758.

［2］王武台，吴锋，高国训，等.芹菜遗传育种研究进展［J］.北方园艺,2012(1):177-180.

［3］何兴金，汤泽生.四川 6 种伞形科植物的细胞学研究［J］.西南农业大学学报，1994,16（5）：488-491.

［4］赵冬,张蜀宁,郑金双，等.中国芹花粉母细胞减数分裂终变期的核型分析［J］.南京农业大学学报，2011,34(1):25-28.

［5］李懋学,陈瑞阳.关于植物核型分析的标准化问题［J］.武汉植物学研究,1985,3(4):297-302.

［6］Levan A,Fredga K,Sandberg A A.Nomenclature for centromeric position on chromosomes［J］.Hereditas，1964，52(2):201-220.

［7］Arano H.Cytological Studies in Subfamily Carduoideae(compositae)of Japan［J］.Bot Mag，1963(76):32-39.

［8］Stebbins G L.Chromosome evolution in higher plants［M］.London:Edward Arnold，1971:87-123.