冯 忠，汪立松，王希佳

组织激肽释放酶(tissue kallikrein，TK)是一类丝氨酸蛋白酶，是组织型激肽释放酶-激肽/缓激肽系统中的一个关键酶[1]。研究表明TK具有保护心脑血管作用[2]。我国一项12家医院联合的多中心、长达5年随访的前瞻性研究表明，TK与脑卒中的新发及再发均呈负相关[3]。然而TK与缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)严重程度有无关系的研究较少。本研究探讨TK与CIS患者严重程度的关系，并进一步探讨TK在临床中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2009年5月—2012年5月在我院神经内科就诊的324例CIS患者为研究对象。纳入标准：(1)CIS诊断参照《各类脑血管病诊断要点》[4]，均经颅脑CT或MRI检查明确诊断；(2)发病至就诊时间<72 h；(3)未经任何治疗。排除标准：肾功能不全、心源性脑梗死、严重炎性疾病、自身免疫性疾病、血液病、肿瘤及其他神经系统疾病者。根据美国国立卫生研究院卒中量表评分(NIHSS)将患者分为两组，其中NIHSS≤12分组238例，男136例、女102例，年龄43～73岁、平均(62.8±6.2)岁，病程1～62 h、平均(12.5±2.2)h，使用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)62例(26.05%)；NIHSS>12分组86例，男51例、女35例，年龄41～74岁、平均(63.1±6.4)岁，病程1～57 h、平均(12.2±1.9)h，使用ACEI 20例(23.26%)。两组性别、年龄及使用ACEI比例具有均衡性。

1.2 方法 详细记录符合入选标准患者的姓名、年龄、性别、病史、个人史、NIHSS等情况。测量体质量、身高，计算体质指数。两组患者均禁食12 h后清晨空腹采血，测定其血脂、肝肾功能及TK水平。其中血脂、肝肾功能采用奥林巴斯全自动生化分析仪检测；TK采用生物素-亲和素双抗体夹心ELISA法检测，具体方法参照张琴等[5]研究。

2 结果

2.1 不同程度CIS患者影响因素的单因素分析 NIHSS>12分组TK水平低于NIHSS≤12分组，差异有统计学意义(P<0.01)；NIHSS>12分组胆固醇、三酰甘油水平高于NIHSS≤12分组，差异亦有统计学意义(P<0.01)；两组的年龄、男性比例、高血压史发生率、糖尿病史发生率、吸烟率、饮酒率及体质指数比较，差异均无统计学意义(P>0.05，见表1)。

2.2 NIHSS与CIS影响因素的相关性分析 NIHSS与TK呈负相关(r=-0.425，P=0.038)；NIHSS与胆固醇(r=0.356，P<0.01)、三酰甘油(r=0.277，P<0.01)均呈正相关。

2.3 CIS严重程度影响因素的多元回归分析 以NIHSS为应变量，TK、胆固醇、三酰甘油水平为自变量，进行多元线性回归分析，结果显示TK水平与CIS严重程度呈负相关；胆固醇、三酰甘油水平与CIS严重程度呈正相关(见表2)。

表1 不同程度CIS患者影响因素的单因素分析

注：NIHSS=美国国立卫生研究院卒中量表评分，TK=组织激肽释放酶；*为χ2值

表2 CIS严重程度影响因素的多元回归分析

Table2 The multiple regression analysis on influencing factor of severity of CIS

变量b标准误b't值P值TK-0.7350.954-0.596-0.8610.021胆固醇1.1021.3531.1123.2210.036三酰甘油1.1161.5211.2314.2160.042

3 讨论

我国每年有150万～200万新发脑卒中病例，发病率为(116～219)/10万人口，年脑卒中死亡率为(58～142)/10万人口。目前我国有脑血管病患者700余万人，其中约70%为CIS，加强脑卒中患者的临床研究是具有重要临床意义的课题。尽管目前研究已经发现CIS与高血压、糖尿病、脂代谢紊乱、肥胖、吸烟、饮酒、性别等因素有关，然而这些因素只能解释部分患者，因此，寻找新的CIS发病相关指标具有重要的临床意义。已有大量基础研究证实TK具有神经保护作用[6]，然而其与CIS严重程度有无关系尚缺乏研究。

NIHSS是包括15个项目的神经功能检查量表，包含每个主要脑动脉病变可能出现的神经系统检查项目(如视野评测大脑后动脉梗死)，可反应脑卒中神经功能障碍严重程度[7]。本研究提示，NIHSS>12分组TK水平低于NIHSS≤12分组，为排除混杂因素影响，进一步进行相关分析和多元回归分析，均显示TK水平与NIHSS呈负相关，表明TK水平可以反映CIS患者的病情严重程度，这是本研究的新发现。TK是1930年由Kraut等在胰腺中发现高浓度此物质，命名为“Kallikrein”。近30年来，随着分子生物学和细胞生物学技术的发展和应用，发现激肽释放酶——激肽系统(kallikrein kinin system，KKS)作为一个复杂的内源性多酶系统，参与调控心血管、肾脏、神经系统等的生理功能，与脑卒中、心脏病、肾病、炎症反应、癌症等疾病的发生有着密切关系。基础研究表明组织型激肽释放酶——激肽/缓激肽系统具有抗血管损伤和预防脑卒中的作用[6]。TK可以减少局灶性脑缺血大鼠模型缺血诱导的神经缺陷和脑梗死体积，抑制神经细胞凋亡[1]。在高血压大鼠发生脑梗死24 h后给予TK的治疗仍然能够促进成神经细胞的增殖、迁移和选择性分化[8]。这些研究均提示了KKS可能具有脑卒中的防护作用。然而，TK与CIS患者病情严重程度是否相关既往报道较少。TK与CIS患者病情严重程度有关的可能原因在于[1-3，6，8]：(1)TK可以扩张脑动脉，改善缺血脑组织的血供和氧供；(2)TK可促进缺血脑新血管和神经形成；(3)TK可促进神经胶质细胞迁移，抑制细胞凋亡，减少炎症细胞浸润；(4)TK可拮抗血管损伤，抑制动脉肥厚；(5)TK可以抑制氧化应激、细胞凋亡和炎症反应。Zhang等[3]对1 268例脑卒中患者进行长达5年的随访，发现TK不仅与脑卒中发生有关，且与二次卒中显著相关，认为是脑卒中的保护因子，本研究与其结论相似，但本研究重在探讨TK与CIS严重程度的关系。与既往研究[9-11]相似，本研究也发现胆固醇、三酰甘油水平与CIS患者病情严重程度相关。姬莉等[12]研究表明脑卒中急性期血糖水平越高，其病情越严重。但本研究并未发现CIS患者病情严重程度与糖尿病有关，可能与本研究入组患者并非全部为急性期患者有关。

综上所述，本研究提示CIS患者TK水平下降，TK水平越低，CIS病情越严重。然而，本研究为单中心研究，病例数不多，尚需大样本、多中心研究进一步证实。

1 Wang YD，Lu RY，Huang XX，et al.Human tissue kallikrein promoted activation of the ipsilesional sensorimotor cortex after acute cerebral infarction[J].Eur Neurol，2011，65(4)：208-214.

2 Liu L，Zhang R，Liu K，et al.Tissue kallikrein alleviates glutamate-induced neurotoxicity by activating ERK1[J].J Neurosci Res，2009，87(16)：3576-3590.

3 Zhang Q，Ding H，Yan J，et al.Plasma tissue kallikrein level is negatively associated with incident and recurrent stroke：a multicenter case-control study in China[J].Ann Neurol，2011，70(2)：265-273.

4 章永强，袁芬芬，应小卫，等.血尿酸和胆红素及血脂水平与缺血性脑卒中的相关关系研究[J].中国全科医学，2011，14(4)：1178-1180.

5 张琴，冉晓，汪道文.社区人群中血浆人组织激肽释放酶含量与血脂的关系[J].中国分子心脏病学杂志，2010，10(1)：57-60.

6 Liu L，Zhang R，Liu K，et al.Tissue kallikrein protects cortical neurons against in vitro ischemia-acidosis/reperfusion-induced injury through the ERK1/2 pathway[J].Exp Neurol，2009，219(2)：453-465.

7 黄小钦，贾建平，宋旸，等.急性缺血性卒中患者超急性期NIHSS评分与CT血管成像脑血管狭窄或闭塞关系研究[J].脑与神经疾病杂志，2010，18(6)：408-412.

8 Lu RY，Luo DF，Xiao SH，et al.Kallikrein gene transfer induces angiogenesis and further improves regional cerebral blood flow in the early period after cerebral ischemia/reperfusion in rats[J].CNS Neurosci Ther，2012，18(5)：395-399.

9 李伟，刘鸣，王丽春，等.脑卒中患者急性期血脂水平与病情严重程度的关系[J].临床神经病学杂志，2007，20(3)：222-223.

10 李鹏翔，苏庆杰，蔡毅，等.缺血性脑卒中二级预防中血脂调控现状分析[J].中国全科医学，2012，15(9)：3173.

11 冯俊强.缺血性脑卒中与血脂水平关系研究[J].实用心脑肺血管病杂志，2012，20(4)：642.

12 姬莉，刘夕珍，张宙，等.脑卒中患者急性期血糖水平与病情严重程度的关系[J].中国实用神经疾病杂志，2008，11(12)：55-57.