段晓辉，于艳芳，裴志萍，陈 杰，张艳丽，王延臣

（1.河北工程大学附属医院耳鼻咽喉科，河北邯郸056002；2.河北省邯郸市第二医院普外科，河北邯郸056002）

·论 著·

30例鼻腔恶性乳头状瘤HGF及其受体c-M et的表达分析

段晓辉1，于艳芳1，裴志萍2，陈 杰1，张艳丽1，王延臣1

（1.河北工程大学附属医院耳鼻咽喉科，河北邯郸056002；2.河北省邯郸市第二医院普外科，河北邯郸056002）

目的 探讨鼻腔恶性肿瘤肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）及其受体c-Met的表达阳性率以及二者的表达分布。方法选择2005年1月—2010年12月确诊为鼻腔恶性乳头瘤患者30例，以同期确定为鼻息肉28例和慢性肥厚性鼻炎18例为对照组，对手术切除组织采用免疫组织化学方法SP法检测HGF、c-Met的表达，统计其染色得分，计算2组的中位数并进行比较。结果2组的HGF和c-Met染色得分均为偏态分布，鼻息肉和慢性肥厚性鼻炎的HGF、c-Met得分都≤240分，鼻腔恶性乳头瘤二者表达得分都高于301分，且分布集中程度较良性鼻腔增生组织高。良、恶性组织HGF、c-Met的得分值比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论HGF和c-Met共同高表达或单独的高表达都与鼻腔恶性乳头状瘤的发生有关。设计针对HGF和c-Met治疗措施可能对恶性乳头状瘤的治疗起到有利作用。

乳头状瘤；原癌基因蛋白质c-met；基因表达

鼻腔恶性乳头瘤是主要发生在鼻腔鼻窦的一种恶性肿瘤，男性发病率高于女性，其发病原因尚未完全明了，但与反复发作的良性鼻腔内翻性乳头状瘤有关，鼻腔内翻性乳头状瘤是上皮源性肿瘤，占鼻腔

肿瘤的0.4％～4.7％，反复发作和容易恶变是其临床特征。肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）及其受体c-Met在众多肿瘤的发生发展中起到重要的作用，且与其预后密切相关［1-2］。本文对手术切除的鼻腔病变组织HGF和c-Met进行检测，分析其表达量的变化及表达分布规律。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择河北工程大学附属医院2005年1月—2010年12月确诊为鼻腔恶性乳头状瘤30例，男性22例，女性8例，年龄33～57岁，平均（45±11）岁。选取良性鼻腔组织增生性疾病（鼻息肉与慢性肥厚性鼻炎）46例作为对照组，男性34例，女性12例，年龄27～48岁，平均（36±10）岁。所有对象均通过鼻内镜下手术切除或鼻侧切开切除病变组织。2组一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 主要仪器及试剂：石蜡切片机为SYD-S1020，阅片显微镜为OLYMPUS光学显微镜，羊抗人HGF多克隆抗体、鼠抗人c-Met多克隆抗体购自北京中山生物技术有限公司，含兔抗羊二抗、兔抗鼠二抗的SP试剂盒购自福州迈新公司。

1.3 方法：所有入选标本均来自手术切除的病变组织，切除组织经福尔马林固定后采用SP法免疫组织化学染色，所有标本免疫组织化学染色实验条件一致，用PBS代替一抗做阴性对照，采用已知道的喉癌标本作为HGF和c-Met的阳性对照。染色结果为HGF与c-Met均定位胞浆，颜色及形态为介于淡黄色至棕褐色颗粒，所有染色后图片均由固定的二位病理医师双盲法阅片。准确计数不同视野下200个细胞，判断细胞染色程度并统计着色细胞个数，计分规则为无色0分，浅色1分，深色2分，并计算每个样本总分数=∑（染色得分×细胞数）。分值介于0～400。

1.4 统计学方法：应用SPSS 11.5软件进行数据处理，统计HGF和c-Met共表达与单独表达的比例并进行比较，采用秩和检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HGF和c-Met表达分布：2组HGF和c-Met染色得分均为偏态分布，鼻息肉和慢性肥厚性鼻炎的HGF、c-Met得分都≤240分。其中HGF染色得分80～240分，介于101～120分之间的例数最多，达到19例（41.3％）。c-Met染色得分21～180分，其中40～60分之间例数最多，高达25例（54.3％）。

鼻腔恶性乳头瘤二者表达得分都高于301分，且集中程度较良性鼻腔增生组织高，分值分布主要集中在321～380分。

2.2 HGF、c-Met表达中位数比较：良、恶性组织HGF、c-Met中位数分别为126.5、71.5、356.5、328.5，恶性组织HGF、c-Met中位数值明显高于良性组织，差异有统计学意义（P＜0.01）。

3 讨 论

HGF是一种具有很强刺激作用的丝裂原，最初是作为一种肝细胞丝裂原从部分肝切除小鼠的血清中得以分离，之后从多种来源的标本中得到。HGF大部分由间质细胞产生，以旁分泌形式作用于上皮细胞，构成间质细胞-上皮细胞相互影响关系，主要刺激上皮细胞增殖、运动，还能促进血管内皮细胞的增殖。c-Met是HGF特异性的受体，定位于细胞膜，其本身是一种原癌基因，具有酪氨酸蛋白激酶活性，其与HGF结合后信号主要介导细胞的增殖、运动，能促进肿瘤细胞的恶性表现，且具有促进肿瘤血管生成，增加肿瘤生长的营养、氧供，对肿瘤生长具有促进作用［3-4］。

人们早就注意到了HGF、c-Met对肿瘤发生发展的作用，张敏等［5］研究口腔恶性肿瘤的发展与HGF、c-Met的关系表明，二者同步阳性表达在口腔癌症的发展中是具有协同作用，且还说明恶性的口腔癌组织中的HGF、c-Met表达具有一致性。有研究［6］表明，HGF能够在成纤维细胞中被TGF-β、IL-1β所诱导表达，且HGF的表达对牙周组织上皮完整性的维持与修复以及牙周炎中的结合上皮的根尖迁移有相关性［7-9］，提示HGF在组织修复中起到作用。文献［10］表明血管生成是肿瘤生长与增殖的必要条件，同时也介导肿瘤的转移，血管生成是影响肿瘤预后的独立危险因素。HGF、c-Met信号通路能增强血管生长因子与血管内皮生长因子的表达，从而促进肿瘤的生长，且HGF/c-Met系统还能降低肿瘤细胞间的黏附，促进细胞外基质的降解，增加肿瘤细胞的运动性，促进肿瘤细胞的脱落与转移能力［11］。

本研究结果显示，恶性鼻腔病变组织的HGF、c-Met与良性鼻腔病变组织在分布区间上存在明显的界限，且恶性组织内的HGF、c-Met中位数值明显的高于良性组织。表明HGF、c-Met的表达上调可能与鼻腔恶性乳头瘤的发生发展存在密切关系，这一结果与二者在其他肿瘤组织中的表达也相符

合［12］。说明HGF、c-Met与不同部位的细胞恶变和肿瘤的发展有关。检测HGF、c-Met的表达对判断恶性肿瘤的预后具有指导意义。鼻内翻性乳头瘤多恶变为恶性鼻腔肿瘤［13］，我们猜测HGF、c-Met可能在这种恶变中起到重要的作用。值得注意的是，HGF/c-Met系统表达上调在许多恶性组织均被检测到，检测HGF、c-Met的表达量对于判断其他组织细胞是否具有恶变倾向尚不清楚，且检测HGF、c-Met缺乏一定的特异性，作为判断肿瘤恶性程度的高低和预后的指标还需与其他特异性高的实验联合判断。

HGF和c-Met不仅与良性细胞的恶变有关，并且还能促进恶性细胞的生长和侵袭，检测具有恶变潜能组织的HGF、c-Met能有效及时地估计疾病发生恶变的可能性，并为研究以HGF、c-Met为靶点的肿瘤治疗方案提供新的依据。

［1］ YAP TA，SANDHU SK，ALAM SM，et al.HGF/c-MET targeted therapeutics：novel strategies for cancermedicine［J］.Curr Drug Targets，2011，12（14）：2045-2058.

［2］ VARKARIS A，CORN PG，GAUR S，et al.The role of HGF/c-Met signaling in prostate cancer progression and c-Met inhibitors in clinical trials［J］.Expert Opin Investig Drugs，2011，20（12）：1677-1684.

［3］ YAP TA，SANDHU SK，ALAM SM，et al.HGF/c-MET targeted therapeutics：novel strategies for cancermedicine［J］.Curr Drug Targets，2011，12（14）：2045-2058.

［4］ GRZELAKOWSKA-SZTABERTB，DUDKOWSKAM.Paradoxicalaction of growth factors：antiproliferative and proapoptotic signaling by HGF/c-MET［J］.Growth Factors，2011，29（4）：105-118.

［5］ 张敏，雷志敏，闫国胜，等.HGF/c-Met、VEGF和uPA在口腔鳞癌组织中的表达及意义［J］.临床口腔医学杂志，2010，26（1）：8-10.

［6］ 武孕霞，段燕.HGF在人牙周膜成纤维细胞中的表达［J］.临床口腔医学杂志，2011，27（10）：584-586.

［7］ 刘丽英，赵满琳，崔占琴，等.龈沟液中HGF及IL-2β含量与牙周炎关系的研究［J］.河北医科大学学报，2006，27（3）：185-187.

［8］ SONNENBERG E，MEYER D，WEIDNER M，et al.Scatter factor/hepatocyte growth factor and its receptor，the c-met tyrosine kinase，can mediate a signal exchange between mesenchyme and epithelia duringmouse development［J］.JCell Biol，1993，123（1）：223-235.

［9］ DRUGAN CS，STONE A，GAME SM，et al.The mitogenic effect of KGF and the expression of its cell surface receptor on cultured normal andmalignanthuman oral keratinocytesand on contiguous fibroblasts［J］.JOral Path Med，1997，26（7）：327-333.

［10］ STROHNEYER D，STRAUSSF，ROSSINGC，etal.Expression of bFGF，VEGF and c-Met and their correlation with microvessel density and progression in prostate carcinoma［J］.Anticancer Res，2004，24（3a）：1797-1804.

［11］ 陈志，颜雨春.肝细胞生长因子-C-Met系统与口腔鳞癌相关性研究的进展［J］.安徽医药，2009，13（1）：8-10.

［12］ 王玉萍，郝志伟，楚天骄，等.乳癌组织中肝细胞生长因子及其受体C-Met的表达［J］.郑州大学学报，2005，40（6）：1133-1134.

［13］ 李树玲.头颈部肿瘤诊断、治疗及预后［M］.天津：天津科学技术出版社，1983：151-152.

（本文编辑：刘斯静）

HGF/c-M et EXPRESSION ANALYSISOF 30 CASESOF NASAL MALIGNANT TUMOR

DUAN Xiaohui1，YU Yanfang1，PEIZhiping2，CHEN Jie1，ZHANG Yanli1，WANG Yanchen1
（1.Department of Otorhinolaryngology，the Affilated Hospital of Hebei University of Engineering，Hebei Province，
Handan 056002，China；2.Department of General Surgery，the Second People's Hospital of Handan，Hebei Province，Handan 056002，China）

ObjectiveTo investigate the HGF/c-Met expression distribution and their positive rate in malignant tumor of nasal cavity.MethodsThirty cases of defined nasal malignant papillomas between Jan 2005 to Dec 2010 were chosen as experimental group.Twenty-eight cases of nasal polyps and 18 cases of chronic hypertrophicrhinitiswere set as controls.All the patients received surgeryal to remove the pathological tissue，immunohistochemical SP was used to detect the expression of HGF and c-Met. Staining scoreswere calculated.The HGF/c-Met expression positivemap was depicted.The scoremedian of the two groups was compared.ResultsHGF/c-Met staining score of two groups were skewed distribution.The scoreswere below 240 points in nasal polyps and chronic hypertrophic rhinitis butwere higher than 301 points in nasalmalignant papillomas，the distribution concentration degree ofmalignant tissueswas higher than those of benign tissues.And themedian score of HGF and c-Met from malignant tissues were significantly higher than those of benign tissues（P＜0.01）.ConclusionThe high coexpression or single expression of HGF/c-Met share some relationship with the development ofmalignant papillomas.Therapy method against HGF/c-Met may play a beneficial role in control of malignant papilloma.

papilloma；proto-oncogene proteins c-met；gene expression

R730.261.6

A

1007-3205（2013）07-0780-03

2012-10-16；

2012-12-02

段晓辉（1977-），男，河北邯郸人，河北工程大学附属医院主治医师，医学学士，从事鼻内镜外科及头颈部肿瘤诊治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.07.013