供精个体和异种动物精浆对小鼠精子介导转染外源基因效率影响的研究

2013-03-15孙新明

井冈山大学学报(自然科学版) 2013年5期

孙新明

孙新明

（井冈山大学医学院，江西，吉安 343000）

探讨供精个体和异种动物精浆对小鼠精子转染外源DNA效率的影响，以探索精子作为外源基因的载体建立转基因小鼠的影响因素。从性成熟小鼠的输精管及部分附睾管中取出精子，用DIG免疫组化方法检测和比较精子转染效率，因素为供精个体和异种动物精浆。不同供精个体间转染效率存在一定差异，但有的个体间差异极显著（< 0.01），而有的个体间差异不显著；共孵育体系中异种动物精浆可显著降低转染效率（实验组与对照组分别为(8.6 ± 1.7)% vs (51.3 ± 5.3)%，< 0.01）。小鼠供精个体和异种动物精浆可影响小鼠精子转染外源DNA的效率。

精子介导基因转染；供精个体；异种动物精浆；小鼠

精子介导基因转移(Sperm-mediated gene transfer, SMGT)是以精子为载体，在受精时将外源目的基因导入卵母细胞以制备转基因动物的一种简单而高效的方法学之一。由于其免去了显微注射法造成的原核损伤，便于转基因动物的研究和在生产中推广应用，因而是生产转基因动物的理想途径。但目前该方法存在很大的随机性和不确定性，特别是在小鼠，精子介导转染外源基因的效率极不稳定[1]，极大的影响了利用精子介导法制备转基因小鼠的应用与推广。

鉴于此，本实验就外源DNA与精子共孵育转基因方法中供精个体与异种动物精浆对精子转染外源基因效率的影响进行研究，以探讨影响小鼠精子介导转染外源基因效率的因素，为利用精子介导法制备转基因小鼠的研究奠定基础。