邢慧芳，李焕敏，王英杰，张旭慧，焦丽琴，李素婷

(1.承德医学院临床医学专业2010级，河北承德 067000;2.指导教师)

学生园地

乙醛刺激大鼠肝星状细胞株HSC-T6增殖的体外研究

邢慧芳1，李焕敏1，王英杰1，张旭慧1，焦丽琴1，李素婷2

(1.承德医学院临床医学专业2010级，河北承德 067000;2.指导教师)

乙醛;肝星状细胞;增殖;模型

肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的活化增殖与酒精性肝纤维化的形成密切相关，是酒精性肝损伤发展至肝纤维化的中心环节[1]。乙醇的代谢产物乙醛是刺激HSC活化增殖，导致酒精性肝纤维化发生的关键因子[2]。本研究以乙醛作为刺激物，观察乙醛刺激大鼠肝星状细胞增殖的最佳浓度和最佳时间，为后期酒精性肝纤维化的的相关研究提供实验数据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器 肝星状细胞株HSC-T6，凯基生物有限公司;DMEM高糖培养基，GIBCO公司;胎牛血清，Hyclone公司;MTT，Sigma公司;DMSO，上海生工。CO2培养箱，日本Taibai LNA-122D;倒置显微镜，德国Olympus;酶标仪，日本BIO-RAD;离心机，上海TGL.16G。

1.2 方法

1.2.1 大鼠肝星状细胞培养:大鼠肝星状细胞株HSC-T6，以含10%胎牛血清的DMEM培养基，置于37℃、5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养，细胞换液时间为1-2d，传代时间为2-3d，传代前用0.25%的胰酶消化。

1.2.2 细胞分组:细胞传代稳定后，HSC随机分为空白对照组和乙醛不同浓度刺激组，每组设3个复孔。乙醛刺激组给予乙醛刺激，空白对照组常规培养。

1.2.3 MTT法检测不同浓度乙醛对HSC增殖的影响:调整细胞计数为1×105后，均匀接种于96孔培养板中培养，每孔总体积为200μl，各组细胞培养至70%-80%融合时，0.4%胎牛血清DMEM培养基同步化处理细胞12h后，更换为完全培养基。……