顾晓荔 孟跃进 廖予妹 胡桂明 任晓爽

郑州大学第二附属医院 郑州 450014

SOX2是一种干细胞转录因子，在胚胎干细胞全能性发育、器官形成及神经分化等方面起着重要的作用。研究发现人体内多种肿瘤的发生、发展与其异常的表达相关。然而关于SOX2在宫颈癌中的表达研究较少，本研究采用免疫组织化学SP法检测SOX2蛋白在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌组织中的表达情况，结合主要的临床病例参数进行统计学分析，探讨其与宫颈鳞癌的发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2011－07—2012－06我院妇产科住院初治的150例子宫切除患者的标本，其中宫颈鳞癌60例，年龄30～69岁，平均43.2岁。根据国际妇产科联盟(FIGO，2000年)临床分期:Ⅰ期33例，Ⅱ期17例，Ⅲ期10例。病理分级:高分化28例，中分化17例，低分化15例。有淋巴转移13例，无淋巴转移47例。术前均未行化疗和放疗。宫颈上皮内瘤变CIN组织70例和因子宫肌瘤等良性病变行子宫切除的正常宫颈组织20例。所取组织标本均由2位病理学专家检查确诊，临床及病理资料完整。

1.2 免疫组织化学SP法检测SOX2蛋白表达 将组织标本常规脱水、石蜡包埋，4μm厚连续切片，脱蜡至水，再按照免疫组化SP试剂盒说明书进行免疫组化染色，一抗工作液浓度以1:200稀释，以0.1 MPBS代替一抗作阴性对照，DAB显色，苏木素复染，盐酸酒精分化，常规脱水透明后中性树胶封片。

1.3 结果判定标准 SOX2蛋白的阳性表达位于细胞浆内，呈现棕褐色颗粒。随机选取至少10个高倍视野(×400)，每个视野(从上至下，从左至右)计数100个完整肿瘤细胞，判定标准:①以着色细胞的百分率记为0～3分，(其中无着色为0分，＜25%为1分，26% ～50%为2分，50%以上为3分);②以着色的深浅记为0～3分，(其中不着色为0分，轻度着色为1分，中度为2分，重度为3分)。以①、②分之和判定结果:阴性(－):0分;弱阳性(+):1～2分;中度阳性(++):3～4分;强阳性(+++):5～6分。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0统计学软件对所记录数据进行处理，所分析资料均为计数资料，各组间比较使用x2检验及Fisher确切概率法等统计学方法进行分析，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 SOX2在不同宫颈组织中的表达水平 结果显示:在60例宫颈鳞癌组织中，41例SOX2蛋白呈阳性表达，阳性表达率为68.3%(41/60)。在70例CIN中，36例呈阳性表达，阳性表达率51.4%(36/70)，而在20例正常的宫颈组织中，仅有7例呈弱阳性表达，其阳性表达率为35%(7/20)。三组间相比较差异具有统计学意义(P=0.03)。进一步比较得出SOX2在正常宫颈组织中的阳性表达率显著低于CIN中的阳性表达率(x2=4.4，P=0.044)和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率(x2=6.944，P=0.016)，而CIN与宫颈鳞癌组织中SOX2的阳性表达率相比较差异无统计学意义(x2=0.674，P=0.464)。详见表 1。

表1 SOX2在不同宫颈组织中的表达情况

1.2 SOX2在宫颈鳞癌组织中的表达 宫颈鳞癌组织中SOX2蛋白阳性颗粒位于细胞浆内，呈现棕褐色颗粒，而且随着细胞分化程度的降低，其阳性颗粒明显增多，染色明显加深。高、中、低分化宫颈鳞癌组织中阳性表达率分别为53.6%、70.6%和93.3%，差异有统计学意义(P=0.027)。I期宫颈鳞癌组织中SOX2蛋白阳性表达率明显低于II、III期，差异具有统计学意义(P=0.023)。有淋巴转移的宫颈鳞癌组织中SOX2的阳性表达率高于无淋巴结转移的鳞癌组织，但两组间相比较差异无统计学意义(P=0.194)。详见表2

表2 SOX2在宫颈鳞癌中的表达水平

3 讨论

SOX基因是具有高度保守的HMGboxDNA结合域的一类SRY相关基因家族，能够编码一些参与多种发育过程的调控，如决定性别、神经发育、多种血细胞生成等多种组织器官发育的转录因子［1－2］。近年来的研究发现，许多疾病的形成与SOX基因的突变关系密切。SOX2作为SOX家族中的一员，是一种干细胞转录因子，在早期的胚胎的发生、器官的形成以及神经的分化，干细胞的研究中起着重要的作用。研究发现SOX2参与了多种肿瘤的形成，如卵巢癌［3］、肺癌［4］、乳腺癌［5］等。陈清江［6］等在对食管癌中SOX2的表达研究中发现，SOX2的阳性表达在食管鳞癌组织，与正常食管的黏膜上皮细胞的表达差异显著，其阳性表达率为56.6%，且肿瘤细胞的阳性颗粒在多在胞浆，呈现明显的棕黄色颗粒。本实验的研究结果显示:SOX2在正常宫颈组织、CIN组织及宫颈鳞癌组织中阳性表达率分别为35%、61.4%、68.3%其阳性表达率是逐渐增加的，三组比较差异具有统计学意义(x2=7.016，P＜0.05)。SOX2蛋白表达与宫颈鳞癌的临床分期、组织分化程度关系密切(P＜0.05)，但在有无淋巴结转移差异无统计学意义(P＞0.05)。SOX2蛋白的阳性颗粒在正常的宫颈组织中主要表达与基底细胞的细胞浆内和接近基底层的棘细胞，宫颈鳞癌组织中的阳性颗粒多见于癌细胞的细胞浆内且染色明显，呈棕褐色，且与分化程度相关，分化程度越低，阳性颗粒的数量越多，染色越强。SOX2在干细胞的全能性及自我更新方面起着重要的作用，研究发现SOX2能够对细胞的命运起到调控的作用，在细胞多潜能性上发挥重要的作用，所以其阳性表达的增加可能是与宫颈癌的分化程度有关，维持了细胞的多潜能性，抑制细胞的成熟分化，从而抑制其向成熟细胞分化;由此可见SOX2阳性表达的增强有可能成为子宫颈癌尤其是中低分化的癌的恶性进展的一个原因。因此SOX2有望成为宫颈癌的临床诊治疗的一个新的靶点。

通过本研究得出SOX2蛋白的过表达可能是导致宫颈鳞癌发生、发展的作用机制之一，但SOX2的确切作用机制目前尚不完全清楚。希望通过对SOX2基因的深入、广泛的研究，进一步了解其在宫颈鳞癌的作用机制，为宫颈癌的早期诊断、临床治疗及预后评估等提供一定的理论依据。

［1］袁虎，王秋菊，韩东一.SOX家族基因的功能及其研究进展［J］.国外医学·遗传学分册，2005，28(6):332 －333.

［2］汪锐，程汉华，郭一清，等.脊椎动物Sox基因家族的系统发生分析［J］.遗传学报，2002，29:990 －994.

［3］ Ye F，Li Y，Hu Y，etal.Expression of Sox2 in human ovarian epithelial carcinoma［J］.JCancer Res Clin Oncol 2011;137:131－137.

［4］ Sholl LM，Barletta JA，Yeap BY，et al.Sox2 protein expression is an independent poor prognostic indicator in stage I lung adenocarcinoma［J］.Am JSurg Pathol2010;34:1 193 －1 198.

［5］ Lengerke C，Fehm T，Kurth R，et al.Expression of the embryonic stem cellmarker SOX2 in early－stage breast carcinoma［J］.BMCCancer 2011;11:42.

［6］陈清江，张明治.SOX2在食管鳞癌组织中的表达及意义［J］.世界华人消化杂志，2011，16(19):1 698 －1 702.

(收稿 2012－10－02)