张 涛，徐志涛，崔 阳，田 跃

(1.承德医学院，河北承德 067000;2.保定市第二医院)

骨肉瘤是常见的源于间叶组织的恶性肿瘤，占原发骨肿瘤的10%，占原发骨恶性肿瘤的20%，75%的病人年龄在10-30岁，是严重影响青壮年身心健康的恶性疾病[1]。转录信号转导子与激活子3(STAT3)目前被定义为癌基因，在促进肿瘤细胞的异常增殖、抑制肿瘤细胞凋亡、加快肿瘤侵袭转移及免疫逃逸等方面发挥重要作用[2-3]。Ryu等的研究发现[4]，大部分骨肉瘤组织磷酸化STAT3蛋白增加，而且预后较未增加者差。干扰素/维甲酸联合应用诱导的细胞凋亡相关基因(GRIM-19)为STAT3特异性抑制蛋白，能够通过特异性抑制STAT3的激活转录及表达抑制肿瘤细胞生长并促进肿瘤细胞凋亡。目前已发现，GRIM-19在肾细胞癌、宫颈癌和神经胶质瘤等多种肿瘤组织中表达降低，但其在骨肉瘤中的表达情况尚未见报道[5-7]。本研究观察了骨肉瘤中GRIM-19与STAT3的表达情况，旨在探讨它们在骨肉瘤发生发展中的作用及意义，为骨肉瘤的早期诊疗提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 临床资料 1993年6月-2013年3月，保定市第二医院和承德医学院附属医院骨科和病理科骨肉瘤石蜡包埋标本35例，男22例、女13例，平均年龄23.5岁(4-56岁)。以近10年的骨软骨瘤石蜡包埋标本14例作为对照。所有标本均行连续切片，片厚4μm。

1.2 实验试剂 鼠抗人GRIM-19多克隆抗体，英国Abcam公司;鼠抗人STAT3单克隆抗体、辣根过氧化酶(HRP)-羊抗鼠多克隆抗体，美国Santa Cruz公司;免疫组化SP-9001二步法检测试剂盒，基因科技(上海)有限公司。

1.3 实验方法 采用免疫组织化学SP法检测骨肉瘤和骨软骨瘤中GRIM-19和STAT3的表达情况，操作按照试剂盒说明书进行，GRIM-19、STAT3多克隆抗体工作浓度分别为1:50、1:100。……