张 莉，苏曼琳

(1.山西农业大学 农学院, 山西 太谷 030801；2.北京林业大学 林学院，北京 100083)

植物抗旱基因HDCS1的克隆和表达载体的构建

张 莉1，苏曼琳2

(1.山西农业大学 农学院, 山西 太谷 030801；2.北京林业大学 林学院，北京 100083)

以二棱大麦幼苗Hordeum distichon Linn.中提取的总RNA为模板，通过RT-PCR的方法获得与抗旱相关的转录因子基因，并将此基因片段用PMD-19T载体进行克隆，序列分析得知该目的片段HDCS1长约664 bp，含有一个完整的阅读框，其编码的蛋白质属于LEA蛋白，且HDCS1与Genebank中已报道的同源蛋白编码基因HVA1（FJ026803.1）序列相似性为98.64%。以植物表达载体PBIl21为基础，将HDCS1基因连接于组成型启动子CamV35S和NOS终止子之间，构建植物表达载体PBI121-HDCS1并进行PCR和酶切鉴定，为提高植物抗旱性研究奠定了基础。

植物抗旱基因（HDCS1）；基因克隆；表达载体

干旱是影响植物正常生长发育的一个最重要的逆境因子，有关植物抗旱性能以及植物与干旱胁迫之间关系的研究一直受到人们的关注[1-2]。随着现代分子生物学与生物技术的发展，人们已经能够从分子水平上研究植物抗旱性能的机制。干旱胁迫会引起植物细胞脱水，从而诱导植物体内多种抗性基因的表达。植物的抗旱性是一个复杂的多基因控制系统[3-5]，抗旱的转录因子可以调控一系列抗旱相关基因的表达，是一种十分有效的提高耐旱性的途径。目前，已有研究从各种植物中发现和鉴定了几十种与抗旱性相关的功能基因[6]。将这些基因转入植物，对抗旱性都有了不同程度的提高。这些抗旱相关功能基因的发现，为人们通过抗旱基因工程改良植物的抗旱性开辟了新的途径。……