白 玲 谢 琦 佘尚扬 夏红卫 刘永明，*

1.桂林医学院(541004);2.广西壮族自治区妇幼保健院

·技术与方法·

精子抗原肽的合成及其在酶联免疫吸附法检测抗精子抗体中的应用价值

白 玲1谢 琦1佘尚扬2夏红卫2刘永明1，*

1.桂林医学院(541004);2.广西壮族自治区妇幼保健院

目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLPl2和SP17抗原肽，经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定，分别包板制备ELISA试剂盒，并检测血清标本。结果:成功合成3种目的肽，质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致，HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%。以3种合成肽为抗原建立ELISA检测AsAb，与商品化试剂盒比较，均显示极好的一致性(Kappa值＞0.75)。结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成，所合成的P10G、YLPl2和SP17抗原肽均具有较好的抗原活性，可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测。

精子抗原肽 抗精子抗体 固相多肽合成 酶联免疫吸附测定法

不孕不育原因很多，其中2% ～10%与免疫因素有关［1，2］，9% ～36%的不孕症夫妇存在抗精子抗体(AsAb)［3］。目前，血清中AsAb阳性已被列为人类免疫性不孕的确定指标之一。建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的AsAb 检测方法对临床免疫性不孕症的诊断和治疗至关重要。现常用的As-Ab检测方法为酶联免疫吸附测定法(ELISA)。研究表明，合成肽能够保持其生物活性及高度专一性的免疫原性［4］，故而研究应用人工合成肽作为抗原制备试剂盒检测抗体受到人们重视［5］。P10G(序列为PGGGTLPPSG)来自一个14kDa的兔精子自身抗原，O'Rand等［6］研究表明来自输精管结扎术的男性和不孕妇女的血清可与合成肽P10G发生免疫反应。……