魏 巍，许艳丽，刘金波，韩晓增

(1. 中国科学院东北地理与农业生态研究所黑土区农业生态院重点实验室，海伦农田生态系统国家野外观测研究站，黑龙江哈尔滨150081;2. 中国科学院研究生院，北京100049)

镰孢菌属真菌(Fusarium spp. )是土壤真菌的主要类群。其可以侵染寄主植物的维管束系统和器官，从而引起植物萎蔫和根、茎、叶和果实腐烂等症状［1］，因此该属真菌是农业生产中作物萎蔫病和根腐病的主要病原菌。由其引发的病害可降低农作物产品品质，甚至导致大量减产，是农业生产上最难防治的土传病害［1－2］。近年来，为降低镰孢菌病害带来的损失，广泛提倡结合化学药剂拌种［3－4］、应用轮作以及保护性耕作等农艺措施［5－6］，施用生防菌［7］等方法改善土壤镰孢菌种群分布，进而缓解病害发生的程度。施肥作为重要的农业管理措施，可以通过直接影响土壤中的化学成分，引起土壤微生物活性和群落结构改变［8］;还可以通过改变土壤物理性状，进而影响地上植被的生长及地下根系发育及其分泌，从而间接地影响土壤微生物群落［9］。然而，长期施肥措施对土壤中镰孢菌种群的影响等方面的研究，还鲜见报道。

土壤中镰孢菌种群密度的研究多采用稀释平板法等传统研究手段，而传统方法的局限性使其无法全面反映自然条件下镰孢菌的种群密度，从而使结果产生偏差。实时荧光定量PCR (real－time quantitative polymerase chain reaction，Real－Time QPCR)技术的提出，为植物病原菌检测提供了全新的方法，即通过实时监测病原菌目的序列的PCR 扩增产物的荧光信号强度并进行解析的方法［10］。……