张段玲，张彦龙，白素英

(东北林业大学，哈尔滨 150040)

小鼠抗食蟹猴IgG单克隆抗体的制备

张段玲，张彦龙，白素英

(东北林业大学，哈尔滨 150040)

目的 制备抗食蟹猴、恒河猴等非人灵长类实验动物免疫球蛋白二级抗体，开展对其传染病血清学快速诊断方法的建立。方法 采用饱和硫酸铵盐析、Agarose-Protein G亲和层析技术，从食蟹猴血清中提纯 IgG。经SDS-PAGE电泳鉴定，采用常规法免疫C57BL/6小鼠，三次免疫后取脾细胞与 Sp2/0-Ag14骨髓瘤细胞通过PEG4000融合制备杂交瘤细胞，利用间接ELISA、Western blot等方法进行筛选、鉴定。结果 得到5株阳性杂交瘤，分别命名为2B6、2B7、2D9、3B2、5E4，并且5株杂交瘤分泌的抗体均与恒河猴的 IgG或血清发生交叉反应，而与其他物种如东北虎、犬等动物的IgG或血清无交叉反应。结论 5株杂交瘤产生的单克隆抗体(McAb)具有较好免疫活性，且能长期、稳定地分泌抗体。此项研究工作为后续研究食蟹猴、恒河猴传染病血清学诊断方法奠定基础。

食蟹猴;IgG;单克隆抗体;亲和层析

食蟹猴(Macaca fascicularis)属于灵长目(primates)猴科(Cercopithecidae)猕猴属。现阶段我国养殖的实验猴主要是猕猴属的食蟹猴和恒河猴，其中食蟹猴为外来种，两者均被列入《濒危野生动植物种国际贸易公约(CITES)》附录Ⅱ中［1］。猕猴属动物亲缘关系上和人类比较接近，与人类遗传物质有75%～98.5%的同源性，是研究人类疾病的理想动物模型，被广泛的应用于传染病、遗传性疾病、心血管疾病、内分泌疾病、药理学和毒理学等研究领域［2－4］。但是食蟹猴及其他非人类灵长类患病种类繁多，如 B病毒、猴痘、猴结核、猴副流感、麻疹病毒病、肝炎病毒病等［5－8］。……