谭晓虹，王治宝，王清佳，蒋欢欢

（1.河北北方学院药学系，河北 张家口075000；2.华北制药股份有限公司质检处，河北 石家庄050000；3.河北北方学院第二附属医院，河北 张家口075000）

五味子是木兰科植物五味子 [Schisandrachinensis（Turcz）Baill]及华中五味子 [Schisandra SphenantheraRehd.et Wils.）的干燥成熟果实，前者2000版药典开始收载为北五味子，后者收载为南五味子。均具有收敛固涩、益气生津、涩精止泻、补肾宁心之功效。五味子含有多种成分，主要含木脂素、多糖、挥发油、三萜、有机酸、氨基酸和无机元素等，这些成分对神经系统、心脑血管系统、消化系统等具有多种药理作用[1]。现代研究证明，五味子还具有抗衰老、抗肿瘤、抗氧化等作用[2－4]，因而五味子在临床上应用广泛，但南、北五味子所含有效成分有区别[5]，其药理作用也存在一定差异[6]，而且文献关于南、北五味子中微量元素的报道较少。本实验应用原子吸收光谱法（AAS）对南、北五味子中所含微量元素进行了测定，目的在于建立南、北五味子中微量元素测定及评价的方法，并比较它们所含微量元素的异同，为科学鉴别南、北五味子的提供实验参考，并为南、北五味子的临床应用提供科学的理论依据。

1 仪器和材料

1.1 仪器

TAS－990型原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）

Fe、Zn、Cu、Mn四种元素的空心阴极灯（北京曙光明电子光源仪器有限公司）

TG—328A型分析天平（上海天平仪器厂）1.2 材料

南五味子（产地：四川）和北五味子（产地：辽宁）均购于张家口市张垣中药饮片有限公司。

Fe、Cu、Zn、Mn标准储备液均为1mg·mL－1（国家标准物质研究中心）；硝酸、双氧水均为优级纯；实验用水均为去离子水。

2 方法与结果

2.1 试剂的配制

2.1.1 空白溶液的制备 用去离子水与浓硝酸配制成0.5%的硝酸溶液

2.1.2 标准溶液的制备 用标准储备液与0.5%的硝酸溶液配制标准溶液，其浓度分别为（μg·mL－1）：

Fe：1.000 2.000 3.000 4.000 5.000

Cu：2.000 2.500 3.000 4.000 5.000

Zn：0.500 1.000 2.000 3.000 4.000

Mn：0.400 0.800 1.600 2.400 4.000 2.2 样品溶液的制备

将南、北五味子用去离子水快速漂洗后置70℃的干燥箱中干燥，然后粉碎成粉末状，置干燥器中备用。用分析天平精密称取南、北五味子样品1.000 0g各5份，分别置于碘量瓶中，加硝酸40mL，静置24h以上，水浴加热直至消化液为无色透明，蒸至近干，冷却后缓慢加入双氧水10mL，继续加热至近干[7]。冷却后，转入50mL容量瓶中，用0.5%的硝酸溶液定容至刻度，待测。

2.3 原子吸收分光光度计工作条件

本实验采用火焰原子吸收光谱法测定样品中的微量元素，经过预实验，进行仪器测定参数的优化，最终选定原子吸收仪器的最佳工作条件[8－9]，见表1。2.4 标准曲线的制备

表1 TAS－990型原子吸收分光光度计工作条件

在表1仪器工作条件下，以空白溶液作参比，分别将Fe、Cu、Zn、Mn的标准系列溶液在原子吸收分光光度计上进行测定，得到各标准系列溶液的吸光度值，以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制工作曲线，得到各元素的回归方程和相关系数r，见表2。实验结果表明Fe在：1.000～5.000μg·mL－1（r＝0.99920）范围内线性关系良好，Cu在：2.000～5.000μg·mL－1（r＝0.99959）范围内线性关系良好，Zn在：0.500～4.000μg·mL－1（r＝0.98451）范围内线性关系良好，Mn在：0.400～4.000μg·mL－1（r＝0.99937）范围内线性关系良好。

2.5 精密度实验

将各元素标准品溶液连续进样五次，测定其吸光度，进行精密度试验，结果用RSD值表示，分别为：Fe：0.383%，Cu：1.06%，Zn：0.630%，Mn：0.177%。

2.6 重复性考察

取同一批药材粉末，按样品溶液的制备方法平行制备5份，依上述方法测定，结果用RSD值表示，见表3。

表2 各微量元素的回归方程和相关系数

表3 重复性试验结果（n＝5）

2.7 回收率试验

采用加样回收法，精密称取已知含量的南、北五味子药材粉末，样品消解定容后，分别加入一定量被测元素的标准溶液，在原子吸收分光度计上依照上述方法进行测定，计算各元素的回收率和相对标准偏差（RSD），结果见表4。

表4 回收率试验结果（n＝5）

2.8 样品的测定

利用原子吸收分光光度计按表1中的测定条件，分别测定样品中各微量元素的吸光度值，利用回归方程求出样品中各微量元素的含量，结果见表5。

表5 样品含量测定结果（±s，μg·g－1）（n＝5）

表5 样品含量测定结果（±s，μg·g－1）（n＝5）

Fe Cu Zn Mn南五味子 179.30±2.00 31.30±0.61 53.32±0.86 114.90±2样品.60北五味子 81.09±2.96 35.43±1.32 61.92±1.59 98.82±2.48

3 讨 论

本实验采用硝酸－双氧水体系消解南、北五味子样品，应用火焰原子吸收光谱法测定南、北五味子中所含的微量元素，结果表明该方法具有精密度好、快速、实用的优点，用于测定中草药中的微量元素的含量可以得到满意的结果。

中草药所含的微量元素在其药效发挥中起着重要的作用，中草药药物作用机理是其有机成分和无机微量元素的协同效应。大量研究表明，中草药微量元素的作用与其含量和存在状态有关，而中草药中所含的微量元素由于产地、气候等因素的不同，微量元素的种类、含量也有差别，从而导致药效上存在差异。本实验对南、北五味子中所含微量元素进行测定，结果表明，南、北五味子中均含有Fe、Mn、Zn、Cu微量元素，且南五味子所含铁、锰的含量高于北五味子。南、北五味子作为临床上常用中药，其药效有所差异，传统上认为北五味子药效良好，更多用于临床，但本实验表明南五味子也含有丰富的微量元素，且某些微量元素的含量还高于北五味子，有文献[10]报道南五味子、北五味子均可明显降低小鼠CCl4急性肝损伤所致的小鼠血清转氨酶水平，南五味子、北五味子相比没有显著性差异。另有文献报道[11]对不同产地和批次的的南北五味子18个样本进行了总木脂素的提取并验证其活性，结果均显示出相近的镇静催眠活性。说明南北五味子木脂素的药理作用强度和特点没有明显区别。因此，对南五味子的药效及临床应用有必要重新认识，进一步考证南五味子的药用价值，使之更广泛地应用于临床，这可以有效解决经济发展和生态环境变迁导致的北五味子的蕴藏量下降和临床需求量不断增长的矛盾。

[1]史琳，王志成，冯叙桥.五味子化学成分及药理作用的研究进展 [J].药物评价研究，2011，34（3）：208－212.

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[3]王艳杰，孙阳，李明珠，等.五味子多糖对S180荷瘤小鼠红细胞免疫抗肿瘤的作用 [J].天津医药，2011，39（9）：824－827.

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[5]付善良，陈波，姚守拙.北五味子和南五味子化学成分的比较分析 [J].药物分析杂志，2009，29（4）：524－530.

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