孙延霞，石张镇，卢振霞，张文龙

（吉林大学中日联谊医院1.血液肿瘤科；2.病理科，吉林 长春130033）

胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，发病率和死亡率居恶性肿瘤之首。其发生是一个渐进过程，发病机制目前尚未完全清楚，多数研究发现其发生与细胞凋亡受阻有关。Survivin是近年来发现的新的凋亡抑制分子，在凋亡和细胞周期的基因调控中发挥重要作用［1，2］。本实验采用免疫组化方法检测了胃癌、癌旁及正常胃粘膜组织Survivin蛋白表达，探讨其在病理分期、淋巴结转移、侵袭程度、预后等临床特征方面的意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料

实验标本取自我院2003年1月－2008年5月胃癌手术切除标本54例，男35例，女19例，年龄最大90岁，最小46岁，平均52岁。术前术后均未行化疗和放疗。按2010年TNM分期标准分期，其中Ⅰ期12例，Ⅱ期17例，Ⅲ期15例，Ⅳ10例。其中腹主动旁淋巴结转移阳性者18例，阴性者36例。病理分化程度：高分化癌29例，低分化癌25例。27例癌旁组织取自距癌组织0.5厘米－1.0厘米。10例正常胃粘膜，取自正常胃粘膜。以上组织均用10%福尔马林固定，切片HE染色，由临床病理专家阅片作出病理诊断。

1.2 试剂 Survivin兔抗人多克隆抗体为Santa Cruz公司产品。二抗及其相应试剂购于迈新公司。

1.3 方法 10%福尔马林固定标本，石蜡包埋，切成4μm厚切片。采用链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（SP）法（SP试剂盒 迈新公司产品），石蜡切片用二甲苯脱蜡，梯度酒精水化后用微波柠檬酸钠修复20min，用过氧化物酶阻断剂（A试剂）阻断内源性过氧化物酶的活性，正常动物血清（B试剂）封闭非特异性抗体，滴加1∶25Survivin多克隆抗体（Santa Cruz公司产品sc－10811），4℃过夜。……