李然伟，魏 巍，刘禄成，温都苏，陈秀玲

（吉林大学第二医院 泌尿外科，吉林 长春130041）

膀胱癌是我国常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率均呈上升趋势，严重威胁人民的生命与健康。目前越来越多的证据表明，微小RNA（microRNA，miRNA）是调节多种肿瘤细胞增殖和凋亡的重要分子［1，2］。miRNA－21是 miRNA 家族的成员之一，在进化上高度保守，被认为具有癌基因的功能［3］。肿瘤抑素（Tumstatin）是一种内源性的血管生成抑制因子与细胞凋亡启动子，具有2个抗肿瘤活性区，不仅通过特异性地抑制血管内皮蛋白合成导致内皮细胞凋亡，使肿瘤新生血管形成受阻，还可抑制肿瘤细胞增殖并促进其凋亡，从而遏制肿瘤生长，因此被普遍认为是一种抑癌基因［4，5］。研究证实，肿瘤的发生发展是一个多步骤，多基因参与的复杂过程，这其中包括癌基因的激活和抑癌基因的失活。肿瘤的发生是由于这一平衡体系失调所致。据此推测，研究反义 miRNA－21／rAV－Tumstatin病毒载体在裸鼠膀胱癌生物学行为中的作用，对临床膀胱癌的研究治疗也可能具有极其重要的实用意义。鉴于尚未见到有关这方面的文献报道，现将我们的实验结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料来源 人膀胱癌T24细胞株购自中科院上海分院细胞所；BALB／C雌性裸鼠20只，10－12周龄，体重（30±2）g，由中科院上海实验动物中心提供；原位肿瘤细胞增殖与凋亡检查试剂盒及即用型HIGH－SABC免疫试剂盒购自Boster；反义 miRNA－21／rAV－Tumstatin病毒载体由本研究室制备保存［6，7］。

1.2 研究方法 ① 动物模型的制备：参照文献［7］，用0.25%胰酶消化，收集对数生长期的T24培养细胞，用含10%胎牛血清的RPMI－1640细胞培养液调整细胞浓度至1×107个／ml。……