副猪嗜血杆菌OMP2基因的克隆及蛋白结构预测
2012-11-22汤德元罗险峰曾智勇李春燕甘振磊王洪光
刘 建,汤德元*,罗险峰,曾智勇,李春燕,甘振磊,王 凤,郝 飞,王洪光
( 1.贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳 550025;2.贵州省动物疫病预防控制中心,贵州 贵阳 550008)
副 猪 嗜 血 杆 菌(Haemophilus parasuis,HPS)是健康猪上呼吸道常见的一种细菌,主要定植在鼻黏膜和(或)扁桃体区域[1],在受到外界刺激下,HPS 可以突破鼻黏膜的屏障迁移到肺部,造成肺炎,而且会进一步的传播导致严重的全身性疫病,主要以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎为特征,咬肌炎较少见[2-3],这种病被称为副猪嗜血杆菌病或格拉泽氏病。副猪嗜血杆菌只感染猪,主要发生在断奶前后和仔猪阶段,多见于5~8 周龄的仔猪,一些应激因素,如长距离运输,恶劣的饲养的环境以及哺乳仔猪断奶过早等,对副猪嗜血杆菌的流行有一定影响[4],该病发病率一般在10%~15%,严重时死亡率则高达50%[5]。HPS 是导致规模化养猪厂仔猪发病死亡的主要原因之一,在过去的几年里,给现代化养猪业造成了重大的经济损失[6]。外膜蛋白(Outer-Membrane Protein,OMP)、荚膜多糖、脂多糖、神经氨酸酶、转铁结合蛋白、毒素蛋白等都是HPS 的主要毒力因子[7],均可导致机体发病。通过对完全获得HPS 免疫保护的动物研究发现,机体并未产生针对脂多糖和荚膜多聚糖的抗体,仅产生了具有中和外膜蛋白作用的抗体,证明外膜蛋白具有更强的免疫原性。本实验通过PCR 技术扩增HPS 的OMP2 基因,应用生物信息学软件对OMP2 基因及其编码的蛋白质进行结构及功能的分析,为研制检测 HPS 抗体的间接 ELISA 试剂盒以及 HPS 基因工程疫苗奠定了基础。……
