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果糖基肽氧化酶法测定糖尿病患者HbA1c

2012-11-12刘俊付波

微循环学杂志 2012年1期
关键词:检测

刘 俊 付 波

糖化血红蛋白(HbA1c)含量可反映糖尿病(DM)患者过去2~3个月时间内平均血糖水平,如果能将其降至8.1%以下,DM并发症的发生将会大大减少。因此,一种快速、简便,准确性及精密度均符合临床要求的HbA1c检测方法对DM治疗、预后均有重要意义。本文采用一种新的酶学方法——果糖基肽氧化酶法测定58例DM患者HbA1c浓度,并与阳离子交换高效液相层析法进行线性回归对比分析,以及观察其精密度和各种干扰因素的影响。

1 资料与方法

1.1 检测对象

选取58例DM患者,其中男39例,女19例;年龄17~59岁,平均46.55岁;T1DM 15例,T2DM 43例,均符合1999年WHO和美国DM协会诊断标准[1]。

1.2 仪器与试剂

美国雅培AEROSET全自动生化分析仪,所用果糖基肽氧化酶法试剂、前处理液、校准品及质控品由日本第一化学公司提供;阳离子交换高效液相层析全自动HbA1c分析仪(HLC-723G7)及配套试剂由日本TOSOH公司提供。

1.3 检测方法

采集58例DM 患者空腹静脉血2ml,EDTAK2抗凝,同时用两种方法检测HbA1c含量。果糖基肽氧化酶法:标本经800g离心力离心5min,取红细胞层25μl加入500μl前处理液中,放置5min后上机测定。其原理为:第一反应中,在蛋白酶的作用下切断源于血红蛋白A1c的β链N末端的糖化二肽,同时通过测定600nm与800nm的吸光度差,求出Hb的浓度;第二反应中,果糖基肽氧化酶作用于糖化二肽,在过氧化物酶存在下生成的过氧化氢与N-(羧甲基氨基羰基)-4,4’二甲胺基二苯胺化钠(显色剂)产生显色反应。通过测定此吸光度求出HbA1c的浓度,根据求得的HbA1c浓度与Hb浓度计算出HbA1c(%)。阳离子交换高效液相层析法:直接检测血液总Hb中的A1c(%)。……

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