洪 滟，史春薇

（ 辽宁石油化工大学， 辽宁 抚顺 113001）

甲基紫分光光度法测定羟基自由基含量

洪 滟，史春薇

（ 辽宁石油化工大学， 辽宁 抚顺 113001）

羟自由基·OH 是氧化能力极强的自由基，其氧化能力仅次于氟，能很容易地氧化各种有机物和无机物。在众多测定羟自由基·OH 的方法中，本文选择采用甲基紫分光光度法测·OH，从实验结果看，实验方法简单，试剂易得，效果良好。

甲基紫分光光度法；壬二酸；机理

羟自由基·OH 是氧化能力极强的自由基，其氧化能力仅次于氟，能很容易地氧化各种有机物和无机物。由于·OH 反应活性大，寿命短，存在浓度低，所以在有关·OH 的研究中，选择分析测试方法特别重要[1-4]。测定羟自由基·OH 的方法有很多种，如电子自旋共振(ESR)法[5]、高效液相色谱(HPLC)法[6]、荧光法[7,8]等，上述这些方法操作复杂，难以在本体系中使用。而甲基紫分光光度法测·OH，方法简单，试剂易得，适合本实验采用。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

0.013 2 g/mL的磷钨酸溶液；5%、15%、30% H2O2溶液；2 mmo1/L的甲基紫溶液；1 mol/L H2SO4溶液。见表1。

表1 仪器与试剂Table 1 Apparatus and reagents

1.2 甲基紫分光光度法测·OH的原理

甲基紫分光光度法测·OH的基本原理是：甲基紫在pH ≥3.0的酸性溶液中呈紫色。·OH容易进攻高电子云密度点，会与甲基紫中具有高电子云密的—C=C—基团发生亲电加成反应，从而使甲基紫褪色。通过测定甲基紫吸光度值的变化可测定出·OH 的生成量。

2 实验结果与讨论

2.1 磷钨酸与·OH生成量的关系

分别取3个烧杯，加入适量蒸馏水，再分别加入1.0 mL 2 mmo1/L的甲基紫溶液，调pH为3.5后，在搅拌的情况下，向烧杯中分别加入质量分数为5%、15%、30%的H2O2，并加入适量磷钨酸溶液，于580 nm处用分光光度计测定甲、乙、丙。……