延胡索总生物碱对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响*
2012-10-17孙世晓杨添淞赵伟丽赵楠田明
孙世晓 杨添淞 赵伟丽 赵楠 田明
(黑龙江中医药大学·哈尔滨 150040)
前言 中药延胡索在临床应用已有上千年历史,早在《雷公炮炙论》即记载“心痛欲死,速觅延胡”,[1]。该药目前在临床上常用于治疗心肌缺血、心绞痛、心律失常、早搏等,具有显著疗效。实验资料表明,
延胡索能影响冠状动脉血流量、心肌收缩力和心肌细胞内钙离子浓度,并能减轻心肌坏死程度,改善坏死边缘区心肌的营养供血[2、3、4、5],但在目前,针对延胡索总生物碱抗心肌细胞凋亡的研究尚未见报道,故本实验进行了相关研究,现报告如下。
1 材料和方法
1.1 材料动物
70只健康成年Wistar大鼠,体重220±20g,雌雄各半,购于黑龙江中医药大学实验动物中心,动物合格证号:SCXK黑2008-004;仪器:PCR仪,Image-ProPlus5.0图像分析系统,GIS凝胶成像分析系统,高速冷冻离心机,动物呼吸机。药品:盐酸普萘洛尔,批号;0901209,天津力生制药股份有限公司生产;延胡索总生物碱由中药实验室自行提取,经光谱比色检测并计算其纯度达到60%,试剂:TUNEL试剂盒,rTaq酶,bax、bcl-2和caspase-3引物,B-Actin。以上试剂购于上海生工生物工程有限公司。
1.2 方法
1.2.1 分组与给药 随机分为7组:正常组、假手术组(只穿线不结扎)、模型组,延胡索总生物碱低剂量(0.5mg/kg)组、中剂量(1.Omg/kg)组、高剂量(2.Omg/kg)组、盐酸普萘洛组;(0.5mg/kg)组,每组10只。各组连续灌服给药14天,其中假手术组、模型组给予灌服等体积蒸馏水。
1.2.2 造模 末次灌胃1小时后,除对照组、假手术组外,其余各组通过冠状动脉结扎复制急性心肌缺血大鼠模型。
1.2.3 心脏标本采集 在冠脉结扎3小时后处死大鼠,立……
