蒋法成 陈树霞 蒋锁俊 孙 浩 范 磊

（1江苏省淮安市动物疫病预防控制中心，江苏省淮安市 223001；2江苏省淮安市清浦区动物卫生监督所，江苏省淮安市 223002）

日本乙型脑炎（Japanese B Encephalitis，JE）简称乙脑，是由日本乙型 脑 炎 病 毒 （Japanese B Encephalitis virus，JEV）引起的一种重要的人兽共患传染病。乙脑病毒可致怀孕母猪流产、产死胎，可致公猪睾丸炎[1]，可致仔猪出现神经症状，给养猪业造成巨大经济损失。

为了解淮安猪场乙脑的免疫状况及野毒感染情况，为乙脑综合防控提供科学依据，2012年5月笔者应用ELISA试验对全市12个规模猪场共246份血清样品进行了抗体监测。现将监测情况报告如下。

1 材料与方法

1.1 血清样品

被检猪血清样品共246份，于2012年3月采自淮安市各县区的12个规模猪场，样品有关信息参见表1、表2。

1.2 检测试剂和仪器

1.2.1 试剂

猪乙脑酶联免疫吸附试验 （ELISA）试剂盒为武汉科前动物生物制品有限责任公司生产，生产批号为120101，购自江苏力通生物技术有限公司。

1.2.2 仪器

酶标仪：Rayto，RT－6000，深圳雷杜生命科学股份有限公司生产；移液器：Biohit，芬兰百得实验仪器 （苏州）有限公司生产；洗板机：KHB，ST－36WT，上海科华实验系统有限公司生产。

1.3 检测方法

按试剂盒说明书进行。 主要步骤如下： （1）1∶40的体积稀释待检血清（195μL样品稀释液中加入 5μL待检血清）、1∶40的体积分别稀释阳性对照和阴性对照血清 （234μL样品稀释液中加入 6μL对照血清）；（2） 取抗原包被板，将稀释好的待检血清和对照血清各取 100μL加入到抗原包被板，置37℃温育 30分钟；（3）洗板，加入稀释好的洗涤液200μL/孔，静置 3分钟，拍干，共洗涤5次；（4）每孔加酶标二抗 100μL， 置 37℃温育 30分钟；……