王作书，李晓华，明 月＊

（1．吉林省消防总队医院，吉林 长春130061；2．吉林大学第二医院 眼科，吉林 长春130041）

人参皂甙Rb1（Ginsenoside Rb1）是由人参中提取三醇组皂甙，具有增强免疫功能、促进学习记忆、抗衰老、抗肿瘤、清除氧自由、改变碳水化合物和脂质代谢等多种生物学效应［1－3］；本室以往研究已证实 人 参 茎 叶 总 皂 甙 （Ginsenoside of Stems and Leaves，GSL）（含Rb2、Rc、Rd、Re、Rf和Rg2）和人参皂甙单体Rb2和Rg3有抑制RPE细胞增殖的作用，我们进一步观察了Rb1对培养的人RPE细胞增生的影响。

1 材料与方法

1．1 材料和试剂 培养的RPE细胞来源于孕26周流产胎儿人胚眼，主要试剂包括：改良的Eagle培养液（Delbecco，s modified Eagle，s medium DMEM培养液）（GIBCO），胎牛血清（FCS，GIBCO），溴化二甲噻唑二苯四氮唑蓝（MTT，北京华美生物工程公司），二甲基亚砜（DMSO，国产分析纯），3H－TDR购自北京原子能研究所，放射强度为lmCi。人参皂甙Rb1由吉林大学基础医学院药理研究室惠增，无色液体，实验前用DMEM溶解配成不同浓度。

1．2 方法

1．2．1 RPE细胞的培养 人胚眼球在无菌条件下，沿扁平部剪开，剔除前部组织、玻璃体及视网膜感觉部，后节眼杯用PBS液漂洗后在解剖显微镜下分成4块展平后，放入DMEM培养液中，显微镜下剥离RPE层，将得到的RPE置于0．25%胰蛋酶（trypsin）中消化30min，FCS终止消化，注吸法分离RPE，离心、清洗后接种于含20%FCS的DMEM培养液，置于37℃，5%CO2的孵箱中培养。RPE细胞为贴附型细胞，取第5代用于实验。

1．2．2 药物浓度与效应关系实验 RPE细胞经酶消化后制成细胞密度2×104／ml细胞悬液，每孔2 ml接种于24孔塑料培养板，孵育24h后换为不含血清的DMEM培养液，加入人参皂甙Rb1，使其终浓度为0、2、5、10、50、100、120、150、200和250μg／ml，每种浓度3孔，培养12h后，更换成不含药物的培养液继续培养24h，trypsin消化制成细胞悬液，给药组和对照组各取3孔台盼蓝染色计数，计算抑制率。……