彭 微，汪世平，郑长黎，宋海鹏，刘 怀

业已证明，疫苗是人们控制传染性疾病传播的最为经济有效的措施之一。近几年来，中南大学湘雅血吸虫病研究室先后构建了几种抗日本血吸虫病天然分子疫苗编码基因相关的核酸疫苗，其中包括编码SIEA26－28 k Da分子抗原的p VAX1／Sj RPS4，以及编码Sj31／32k Da分子抗原的p VAX1／Sj CB等。在此基础上，本研究将已经构建成功的p VAX1／Sj RPS4·CB多价疫苗免疫小鼠，进一步观察疫苗免疫后对小鼠肝脏虫卵肉芽肿的病理形态学改变及周长和面积的影响，从而为该疫苗的免疫保护力研究提供有意义的形态学资料。

1 材料与方法

1．1 实验动物 阳性钉螺系中南大学湘雅血吸虫病研究室提供，从人工毛蚴感染钉螺后筛选获得；清洁级昆明小鼠，雌性，体重25～30 g，由湘雅中南大学实验动物学部提供。

1．2 质粒 p VAX1／Sj RPS4、p VAX1／Sj CB、p VAX1／Sj RPS4·CB由湘雅血吸虫病研究室构建并保存。

1．3 动物分组及实验方案 55只昆明小鼠随机分成5组：PBS对照组、p VAX1空质粒组、p VAX1／Sj RPS4单价疫苗组、p VAX1／Sj CB单价疫苗组、p VAX1／Sj RPS4·CB多价疫苗组。每组注射相应质粒100μg或等量PBS，注射部位为左后腿股四头肌。每隔2周加强免疫1次，共3次。末次免疫后2周经腹部皮肤攻击感染20±1条日本血吸虫尾蚴，感染后第6周处死小鼠。

1．4 肝组织石蜡切片及HE染色 随机自各组取5只小鼠剖杀，肝组织经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋，制成石蜡组织块，制成10μm的连续切片，按常规方法进行HE染色。

1．5 虫卵肉芽肿周长和面积的测量 采用UVP成像系统，在100×视野下，每组选取15个肉芽肿，测量肉芽肿的面积和周长，测量数据采用方差分析检验。……