结核分枝杆菌CFP－10与Rv2626c蛋白的表达及血清学诊断研究＊

2012-09-26朱中元王海波肖劲逐邱一帆刘爱国

中国人兽共患病学报 2012年12期

朱中元，张丹，王海波，肖劲逐，邱一帆，颜磊，陈德，刘爱国，杨欣

结核病是当今世界上由单一致病菌感染引起的死亡率最高的疾病，严重威胁着人类的健康。全世界大约有三分之一的人感染了结核菌，并且感染人数在以每年700万～800万的速度增加。因此，结核病快速准确的早期诊断成为控制结核病流行的重要手段之一。目前我国结核病诊断主要由临床表现、影像学诊断结合痰涂片镜检、细菌培养或PPD皮试进行。但是由于常规细菌学检查方法的灵敏性差，而且细菌培养费时长（6～8周），以及受人为操作影响等原因，这些方法对于结核病快速的帮助有限［1］。ELISA方法测定结核菌抗体水平具有简单、低廉、快速的特点，作为结核病的辅助诊断方法之一，正逐渐被众多研究者所重视。结核菌分泌许多蛋白到细胞外，在结核病人的免疫反应发挥了很重要的作用。研究表明CFP－10是T细胞的靶抗原，能诱导皮肤迟发型超敏反应并刺激外周血单核细胞产生特异性IFN－γ［2］。Rv2626c抗原是 MTB休眠期特异表达的蛋白之一，有较强的抗原性，可激发宿主机体产生较高的抗体水平［3］。本实验通过构建结核菌CFP－10、Rv2626c蛋白表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达，并对表达产物进行纯化，以获得大量CFP－10抗原、Rv2626c抗原，同时将重组的CFP－10、Rv2626c蛋白组成联合抗原进行ELISA实验，为探索重组蛋白在结核病血清学诊断的应用奠定前期实验基础。