陕北枣ISSR反应体系的建立及其优化
2012-09-25王延峰史妮妮李永鑫贺晓龙陈国梁
王延峰,史妮妮,李永鑫,叶 飞,贺晓龙,陈国梁
(1.延安大学生命科学学院,陕西 延安 716000;2.陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心,陕西 延安 716000)
中国是枣类遗传变异和起源较早的中心地区之一。枣也是陕北地区重要的经济植物之一,随着西部大开发以及退耕还林的实施,枣业经济得到迅猛发展,在陕北黄河沿岸诸县脱贫致富中发挥着越来越重要的作用。由于枣树的单胚性特点,在复杂的生态环境下,形成了极其丰富的遗传多样性,这也就导致了至今为止人们对于该种质资源的演化关系及其种间关系不甚清楚,给枣的优质种质资源的保护带来了不便。前人对枣品种的分类从形态学、细胞核型分析、同工酶生化标记等方面做了大量的研究[1],但都因其工作过程繁琐、费时,以及受敏感的生态环境和其有限的标记数量与因素的影响,使枣树的遗传多样性研究一直受到限制,这也就使得人们将研究的方向转到了分子生物学方面。近几年,相继出现了许多DNA 分子标记技术,如SSR(simple sequence repeats,简单重复序列)、简单序列重复区间扩增多态性(inter-simple sequence repeats,ISSR)、RFLP (restriction fragment length polymorphism,限制性内切酶片段长度多态性)、AFLP(amplified fragment length polymorphism 扩增片段长度多态性)、RAPD(random amplified polymorphic DNA,随机扩增多态性DNA)等[2-3]。其中ISSR(inter simple sequence repeat)标记是基于微卫星序列发展起来的一项技术[4],它是根据植物广泛存在简单重复序列的特点,并利用在植物基因组中常常出现的简单重复序列本身设计引物,无需预先克隆和测序。ISSR 标记通常为显性标记,呈孟德尔式遗传,具有很好的稳定性和多态性,已在果树遗传学如品种鉴定、亲缘关系分析、遗传多样性分析以及遗传图谱的构建等方面得到广泛应用[5-12]。……
