草莓叶盘再生和遗传转化体系的优化
2012-09-20狄少康张秀芹朱延明
柏 锡,狄少康,张秀芹,朱延明
(东北农业大学生命科学学院,哈尔滨 150030)
草莓(Fragaria ananassa Duch.)属蔷薇科草莓属多年生草本植物,是世界上广泛栽培的重要经济果树[1]。由于草莓基因的高度杂合性和染色体的多倍性,受到有益性状定向改良难、育种范围窄、耗时长等限制。James等获得第一棵草莓转基因植株,标志着草莓基因工程开始[2]。此后,草莓遗传转化研究进入实用性阶段,它可以有目的、有计划地向草莓引入优良性状而不需要改变它原有其他特性,使草莓品种改良具有定向性和预见性,获得常规育种难以或无法得到的新类型,从而创造出新种质。目前已获得抗病[3]、抗虫[4]、抗逆、抗除草剂和品质改良等方面转基因植株。
目前,在草莓上采用的遗传转化方法主要有农杆菌介导法、基因枪法和电击法等。目前应用于草莓上的基因导入法主要是农杆菌介导叶盘法[5-6],以叶盘法获得转基因草莓新品种的前提条件就是要建立一个高效稳定叶盘再生受体系统。基因型、外植体[7]、pH、生长调节剂的种类、配比与浓度以及AgNO3[8]等对草莓叶片不定芽再生都具有显著影响。于冬梅等研究发现20~30 d叶龄的草莓叶片为诱导分化不定芽最适叶龄[9]。陈琴芳等研究发现,章姬在TDZ 8.0 mg·L-1时再生率最高为60.5%,丰香则在TDZ 2.0 mg·L-1时再生率最高为58%,并确定TDZ 1.0 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1的培养基为草莓基本再生培养基[10]。张利义等研究发现,全明星在MS+TDZ 1.5 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1再生效果好,再生率高达86.6%[11]。应用基因工程手段在基因水平上改良草莓品种已取得一定进展,但仍然存在转化效率低、外源基因表达强度不够、遗传转化系统不完善等问题。……
