王学东，李桂南，李明阳

(华东理工大学a.生物反应器工程国家重点实验室;b.鲁华生物技术研究所，上海 200237)

腈类化合物是一类非常重要的化合物。腈类物质的水解反应在氨基酸、酰胺、羧酸以及它们的衍生物的合成中有着非常广泛的应用［1－4］。

对腈类物质水解的方法有化学水解法和酶法2种。化学水解法一般需要满足强酸(或强碱)、高温、高压等比较剧烈的反应条件，效率低、成本高，同时也造成了相当的环境压力。而酶法水解则具有反应条件温和、高效、专一、成本低、环境污染小等优点［5－7］。

由于天然腈类化合物的存在，许多微生物都有转化腈类物质的能力。从20世纪60年代开始，人们从假单孢菌(Pseudomonas)、红球菌(Rhodococcus)、产碱杆菌(Alcaligenes)、克雷伯氏菌(Klebsiella)中发现并得到了腈水解酶［8］。近年来，随着宏基因组技术的快速发展，人们从自然环境中获得了大量未培养微生物的基因组，其中已测序的腈水解酶基因也大量出现，这就为腈水解酶的进一步研究提供了更多材料。

利用基因重组技术，构建具有腈水解酶活性的新型基因工程菌株，可以在不同程度上解决生产中遇到的许多问题，如提高酶的表达水平、增强酶的热稳定性、减少副反应的发生等。1987年，Stalker等［8］首次在克雷伯氏菌中克隆得到腈水解酶的基因，并在大肠杆菌中进行了表达。近年来，国外对重组腈水解酶的研究日益增多，但国内相关报道却比较少。国内王清路等［9］研究了腈水解酶基因在毕赤酵母中的表达，罗晖等［10］和刘俊峰等［11］分别研究了腈水解酶基因在大肠杆菌中的表达情况。……