闫冰，宋新刚，李尊江

（哈药集团生物疫苗有限公司， 黑龙江哈尔滨 150069）

无菌塑料瓶无菌检验方法的验证

闫冰，宋新刚，李尊江

（哈药集团生物疫苗有限公司， 黑龙江哈尔滨 150069）

无菌塑料瓶是兽用灭活疫苗的主要内包装材料，灭活疫苗为非最终灭菌的产品，所以要求用于内包装材料的塑料瓶在使用前达到无菌。对无菌塑料瓶进行无菌检验，是保证产品质量的必要的条件。《中国兽药典》2005年版要求在对制品进行“无菌检验”及“微生物限度检验”时，应进行方法学验证，以确认试验中供试品应选择药典中所收载的何种供试液制备方法、保种测定方法，保证“无菌检查”或“微生物限度检查”方法的科学性和检验结果的准确性。

一、样品与仪器

1.样品。无菌塑料瓶，规格为100 ml/瓶，生产批号为091134。

2.试验用菌种。金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、铜绿假单胞菌（ATCC9027）、生孢梭菌（ATCC11437）、白色念珠菌（ATCC10231）、黑曲菌（ATCC16404）。所有菌株均来自中国兽药监察所。

3.稀释液。0.9%氯化钠溶液，经121℃30分钟高压灭菌。

4.培养基。硫乙醇酸盐液体培养基（50 ml/瓶）、葡萄糖蛋白胨培养基（50 ml/瓶），均为本公司自制，经无菌检验及培养基灵敏度试验合格。

5.仪器设备。薄膜过滤器6套，振荡仪、生化培养箱。

二、方法与结果

1.方法。

（1）取样量：每个过滤器取三支塑料瓶，分别加入标示量1/2的氯化钠无菌水溶液。

（2）每个过滤器取三支塑料瓶，分别加入标示量1/2的氯化钠无菌水溶液，轻轻振摇涮洗内壁，按薄膜过滤法过滤，取出滤膜分成两份，分别接种于硫乙醇酸盐液体培养基和葡萄糖蛋白胨培养基中培养，作为供试管。……