● 王伟东

红藤消炎灌肠液具清热解毒，活血化瘀功效，临床用于附件炎、盆腔炎。其成分为大血藤、野菊花、蒲公英、地丁、败酱草、三棱、莪术(醋制)、桃仁、延胡索(醋制)、香附(醋制)、木香等11味中药，因处方中多味药有抗菌、消炎的作用，对试验菌采用常规方法做微生物限度检查时，对阳性试验菌干扰，阳性试验菌的回收率达不到药典要求的不低于70%。我们采用薄膜过滤法［1］，按中国药典2010年版二部相关规定［2］进行试验，结果表明，该法省时、易操作，适用于红藤消炎灌肠液微生物限度检查。

1 材料

1.1 仪器 净化工作台(szk－202安徽省蚌埠净化设备有限公司)、隔水式恒温培养箱(PYX_DHS－40*50上海市跃进医疗器械厂)、立式灭菌器(3260J山东新华医疗器械有限公司)、薄膜过滤器(杭州泰林生物技术有限公司)、集菌仪(H601杭州高得医疗器械有限公司)。

1.2 培养基 营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、改良马丁氏液体培养基、改良马丁氏琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基、溴化十六烷三甲胺琼脂培养基，均由北京陆桥技术有限公司生产。

1.3 稀释剂 氯化钠－蛋白胨缓冲液，北京陆桥技术有限公司生产。

1.4 菌种 大肠埃希菌［CMCC(B)44102］、金黄色葡萄球菌［CMCC(B)26003］、铜绿假单胞菌［CMCC(B)10104］、枯草芽孢杆菌［CMCC(B)63501］、白色念珠菌［CMCC(F)98001］、黑曲霉［CMCC(F)98003］由中国药品生物制品检定所提供，所有菌种均为第4代。

1.5 样品 红藤消炎灌肠液(500ml/瓶)，黄石市中医院制剂室提供。

2 方法

2.1 细菌数、霉菌和酵母菌数检查方法的验证

2.1.1 菌液制备 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，35℃培养18～24h，取上述新鲜培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液，稀释至活菌数50～100cfu·ml－1，备用。……