潘鑫艳，王 丽，陈 玥，黎贵芸，杨丽琳，杨举伦

弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin's lymphomas，NHL)最常见的类型，占所有NHL的30% ～40%，呈中 －高度恶性。DLBCL的形态学分型由于主观性强、可重复性差，难以向临床提供有效、准确的治疗和预后信息［1］。免疫组化技术对区分DLBCL的免疫学表型有重要的价值［2］，然而对于一些疑难病例，形态学和免疫组化也难以分辨。近年来随着分子生物学的发展，基因异常检测逐渐成为恶性淋巴瘤诊断的重要补充手段［3］。免疫球蛋白(Ig)基因重排是B淋巴细胞克隆的特异性标志［4-6］，是目前较适合区分DLBCL免疫学表型的检测手段［7］。

2000年Alizadeh等［8］首先通过对基因表达谱结果分析，提出DLBCL可分为2型，即生发中心B细胞型(germinal center B-cell-like，GCB)和活化B细胞型(activated B-cell-like，ABC)。2004年 Hans等［9］以cDNA微阵列为参照对DLBCL进行亚分类，提出DLBCL分为GCB和非GCB(non-GCB)2种类型，二者的预后不同［10-14］。目前大多数文献只对其检测率进行探讨，本实验利用BIOMED-2克隆分析系统研究DLBCL中Ig基因重排规律，探讨GCB和non-GCB中Ig基因重排特点，以期为DLBCL的诊断及分型提供更为简捷的检测途径，同时为临床应用提供更为可靠的依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 组织样本:收集成都军区昆明总医院病理科2010年1月—2012年1月经10%中性福尔马林固定、石蜡包埋的46例手术切除的淋巴组织病变标本，全部标本均经2名有经验的病理医师结合形态学及免疫组化确认为DLBCL，以15例反应性增生病变作为阴性对照。

1.1.2 主要试剂:免疫组化试剂CD10、MUM1、Bcl-6购自Dako公司;QIAamp®DNA FFPE Tissue Kit购自德国QIAGEN公司;10×PCR buffer、rTaq DNA聚合酶购自TaKaRa公司;2.5 mmol/L dNTP Mixture、6×Loading buffer、50 bp Marker购自天根生化科技公司;BIOMED-2引物序列由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。……