RP-HPLC法测定蒙药黄柏-8味散中小檗碱的含量
2012-09-12萨仁高娃吴双英白玉霞
萨仁高娃 吴双英 白玉霞
(1.内蒙古民族大学附属医院,内蒙古 通辽 028041; 2.内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古 通辽 028041)
蒙药黄柏-8味散由黄柏、香墨、栀子、甘草、红花、荜茇拨、黑云香、牛胆粉等8味蒙药组成的传统蒙药制剂,具有清热凉血、固精之功效。临床上主要用于肾热、尿路感染、尿中带血、经下过多等病症[1]。运用HPLC法测定盐酸小檗碱的含量。本方法精密度高,分离效果良好,平均加样回收率为98.17%,RSD=0.50%;为蒙药黄柏-8味散的质量标准制定奠定了良好的基础。
1 仪器与材料
1.1 仪器:日本岛津产LC-10ATVP型高效液相色谱仪(双泵、二极管阵列检测器);KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司);电子天平 AUW220D(Max 220g d=0.01 mg)日本岛津公司。
1.2 试药:黄柏-8味散:内蒙古蒙医药学院附属医院(070314,080811),自制的蒙药黄柏 -8味散按文献[1]方法制备,小檗碱对照品:中国药品生物制品检定所,批号110713-200708,流动相用乙腈为色谱纯,水为重蒸馏水;其余溶剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件[2,3]:LC -10ATVP 泵,SPD - M10AVP 检测器,SCL-10AVP工作站,VP-ODS柱(250mm ×4.6μm);流动相:乙腈-0.5%三乙胺水溶液用磷酸调 PH3(28:72)[2];流速 1.0 mL·min-1;柱温 25℃;检测波长 345nm,在此条件下,样品中小檗碱与其它成分达到基线分离。结果见图1。
2.2 标准曲线的制备[2]:精密称取盐酸小檗碱对照品3.01mg,置10mL容量瓶内,加甲醇3.0mL溶解,精密吸取此液1.0mL置50mL容量瓶中加甲醇至刻度即得20.067μg·mL-1的标准溶液。精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液5.0μL;7.5μL;10.0μL;12.5μL;15.0μL 进样,测定峰面积,按峰面积积分值对浓度进行线型回归计算,得标准曲线回归方程为 A=1996763C -3470.5,r=0.9999。结果表明小檗碱在0.10034~0.30101μg范围内呈良好的线性关系,结果见表1。……
