结核分枝杆菌复合群检测在AIDS合并结核病诊断中的应用
2012-09-11杨绍敏樊移山李惠琴杨壁珲李正伦周曾全
杨绍敏,樊移山,李惠琴,高 丽,杨壁珲,张 米,李正伦,周曾全
(云南省传染病专科医院艾滋病关爱中心检验科,云南 昆明 650301)
获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并结核病时由于免疫缺陷导致常规抗酸染色阳性率低[1-2]、结核菌素试验无反应[3]、临床结核中毒表现不典型[4-5]、结核分枝杆菌培养时间较长。临床诊疗迫切需要实验室提供早期、特异的病原学诊断信息。我们探讨了结核分枝杆菌转录酶主导基因扩增法(TMA)直接扩增结核分枝杆菌复合群(MTD)RNA在AIDS合并结核病患者实验诊断的临床应用。
材料和方法
一、研究对象
具有以下入组标准1条以上症状者即可入组。(1)持续发热在38℃左右超过2周者;(2)频繁咳嗽或阵发性咳嗽、咳痰超过3周者;(3)咳血或伴有血痰者;(4)有盗汗者;(5)有咽痛、胸痛超过2周者;(6)胸腔积液,胸部X线检查异常者;(7)头痛伴或不伴呕吐、意识障碍者;(8)淋巴结明显红、肿、痛并持续发热超过2周者;(9)胸、腹水原因不明并持续发热超过2周者。2009年7月至2010年6月共入组152例疑似结核病待诊患者。其中AIDS患者127例,男84例,女43例,年龄8~74岁。由云南省艾滋病关爱中心艾滋病确证实验室采用免疫印迹法(WB)确证。对照组25例,男18例,女7例,年龄18~77岁,为同期内科住院和门诊非人类免疫缺陷病毒(HIV)感染但临床疑似结核病待诊患者。
二、样本种类
经培训的医护人员规范采集临床样本[6],AIDS组127例样本均为痰液,对照组25例样本中有3例灌洗液、3例术后痰、1例支气管刷落物。
三、仪器和试剂
1.美国GEN-PROBE LEADER 50i化学发光检测仪;水浴超声震荡仪;95、60和42℃干浴孵育器;MTD检测试剂盒(Amplified MTD)。……
