2型糖尿病患者CR1基因多态性与红细胞CR1数量、黏附活性相关性研究
2012-09-11高利常王冬梅邹吉敏袁宝军
安 新,高利常,王冬梅,邹吉敏,李 超,袁宝军
(河北联合大学附属开滦医院检验科,河北 唐山 063000)
1型补体受体(complement receptor 1,CR1/CD35)是红细胞膜上主要的免疫物质,是红细胞有效清除免疫复合物(IC)的物质基础,参与许多疾病的发生及发展,从而成为国内外学者的研究热点[1-4]。2型糖尿病(T2DM)是一种慢性终身性疾病。近年来发现T2DM患者红细胞免疫功能低下,且与病程及并发症的发生、转归密切相关[5-7]。为进一步探讨T2DM与CR1基因多态性及红细胞CR1数量、黏附活性的关系及意义,我们对T2DM患者进行了研究。
材料和方法
一、临床资料
选择河北联合大学附属开滦医院临床确诊T2DM患者132例,均符合世界卫生组织(WHO)1997年诊断标准,其中男63例,女69例,年龄39~82岁。正常对照组124名,来自河北联合大学附属开滦医院健康体检者,其中男66名,女58名,年龄37~79岁。2组人群均排除心脑血管、血液系统、免疫系统和其他内分泌系统疾病,未曾接受改善免疫功能的治疗。
二、检测项目及方法
1.红细胞CR1黏附活性测定 (1)血样本处理:无菌采集所有对象清晨空腹外周血2 mL,枸橼酸钠抗凝,780×g离心,使红细胞沉淀备用;(2)靶细胞配置:37℃溶解已分装冰冻的靶细胞(肿瘤细胞),加入1 mL生理盐水,混匀,2100×g离心5 min,吸净上清液(切勿吸掉细胞),加入150 μL 生理盐水混匀,备用;(3)加样:取 1 μL 红细胞和100 μL血浆加入靶细胞管,混匀,37℃水浴30 min后加200 μL缓冲液,轻轻颠倒混匀;(4)结果判断和计数:取150 μL反应液置玻片中央,加一滴瑞姬氏染液并水平涂开,显微镜下计数100个靶细胞,结合5个以上红细胞的靶细胞为一个单位,计算“黏附率”,即黏附活性。……
