杨 红，陈成水

Toll样受体4参与介导黄曲霉毒素G1对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤作用

杨 红，陈成水

目的 在基因水平上探讨Toll样受体4（TLR4）参与介导黄曲霉毒素G1（AFG1）对肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤生物学效应，及其作用机制和途径。方法 分离、纯化、培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞并配置3个不同浓度的AFG1液体。实验随机分为正常组、实验组、溶剂对照组，每组6个样本。正常组加入同等量的无菌生理盐水；实验组加入不同浓度的AFG1液（高、中、低浓度分组），溶剂对照组加入同等量的二甲基亚砜（DMSO），终浓度为0.4 ml/ L；同时处理24 h后在上述5组提取细胞mRNA，采用RT-PCR法检测各组TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达水平。结果 正常组肺泡Ⅱ型上皮细胞上TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达量较低。实验组经AFG1液作用后，各项指标的表达量显著高于正常组（P<0.05）和溶剂对照组（P<0.05），且呈浓度依赖性增高。溶剂对照组各项指标的表达量与正常对照组相比，无显著性差异（P>0.05）。结论TLR4→NF-κB→炎症介质信号转导通路参与AFG1对AT-Ⅱcells的损伤作用。

肺泡Ⅱ型上皮细胞；肺损伤；黄曲霉毒素G1；Toll样受体4；核因子（NF）-κB

已有研究在整体水平和细胞水平上证实了黄曲霉毒素G1（AFG1）对大鼠肺组织和肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-IIcells）结构和功能的急性影响和损伤的生物学效应[1]。通过RT-PCR技术分离培养的AT-Ⅱcells有TLR4mRNA的表达，受外源性刺激后表达增强，且呈一定的浓度依赖性[2]。所以，AT-Ⅱcells是AFG1作用于肺组织的靶细胞，AT-Ⅱcells上有TLR4的表达。那么，AFG1诱导AT-Ⅱcells损伤的调控机制中是否存在TLR4介导的信号通路的存在，关于TLR4信号转导通路是否参与AFG1致AT-IIcells损伤生物学效应的研究，尚未见报道。所以，基于以上基础，笔者等在实验中设想将原代培养的大鼠AT-IIcells作为研究对象，通过不同浓度AFG1对AT-IIcells的刺激，探讨TLR4信号转导通路是否参与AFG1致AT-IIcells损伤生物学效应过程及其具体的途径。……