徐 虹 李 汛 王鲁文 龚作炯

武汉大学人民医院感染科 (湖北武汉，430060)

急性肝功能衰竭是一种病因复杂、进展快、病情重、病死率高的临床综合征，其发病机制复杂，尚未阐明。但目前大多数学者支持由病毒直接或间接 (免疫反应)所致的原发性损害;由内毒素及多种细胞因子如TNF-α、IL-4等介导的继发性损伤的“两次打击”学说［1］。降钙素原 (Procalcitonin，PCT)是无激素活性的前肽物质，是近年来新发现的一种具有高特异性和敏感性的炎症感染指标。本实验通过建立D-氨基半乳糖盐酸盐诱导的大鼠急性肝衰竭 (acute liver failure，ALF)模型，观察大鼠ALF时血清及组织中PCT水平的变化，探讨PCT与细胞因子变化之间的关系。

1 材料与方法

1.1 动物模型的制备 将25只雄性Wistar大鼠 (武汉大学医学部动物实验中心，重200～220g)随机分为两组：①模型组20只，大鼠在禁食后12小时腹腔注射D-氨基半乳糖盐酸盐溶液 (江苏省启东市经贸有限公司)，每只大鼠注射的剂量为1.2g/kg;②正常组5只，于大鼠腹腔内注射等量生理盐水，24小时后处死。模型组大鼠在造模后12小时及24小时，分别取10只大鼠用10%水合氯醛麻醉，行心脏采血，分离血清，-80℃冻存备检。同时留取肝组织、脾组织、小肠组织各100mg，加入0.9%生理盐水350μl，冰上匀浆，4℃离心后取上清液，-80℃冻存备检。另取部分肝组织用10%甲醛溶液固定，行常规的石蜡包埋，切片，HE染色，观察肝组织的病理学改变。

1.2 检测指标与方法 ①血清及组织PCT的检测：采用ELISA法检测大鼠血清及肝脏、脾脏、小肠组织的PCT，实验步骤按试剂盒 (上海西唐生物科技有限公司)说明书操作。……