朱 英 刘 平

1.大连医科大学附属第一医院 (辽宁 大连，116011) 2.上海中医药大学

目前纤维化或早期硬化组织器官的结构重构成为现代生物医学中的重大科学问题，而干细胞已成为组织器官结构重构过程中的研究焦点。干细胞是一类具有自我更新和多向分化增殖潜能的原始细胞，其对细胞的生理性更新、对病理性损伤的反应与修复以及组织重构都具有重要意义。

研究显示肝损伤过程中，干细胞参与了肝细胞再生和肝损伤修复，骨髓、胚胎等多种来源的干细胞也具有向肝细胞分化的潜能，因此从干细胞的角度探讨肝细胞再生机制及再生肝脏功能具有可行性和重要性。

本研究应用二甲基亚硝胺 (DMN)造成类似于人类的大鼠肝硬化模型，应用较为敏感的Thy-1.1作为肝脏卵圆细胞(HOC)标记物，观察HOC在肝硬化形成与消减过程中的动态变化;同时应用双重荧光免疫激光共聚焦检测技术观察HOC的分化取趋向，应用黄芪汤治疗，观察黄芪汤在肝硬化逆转中的作用及其对HOC的影响，探讨中药在肝硬化组织重构过程中的作用与意义。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂 wistar大鼠，雄性，体重160g±15g，清洁级，由中国科学院上海实验动物中心提供。于上海中医药大学实验动物中心清洁区动物房饲养、造模和观察，自由饮食。DMN为东京化成工业株式会社产品：lot.MAL05。鼠抗Thy1.1单克隆抗体为SeroTec公司产品;鼠抗CK19和AFP单克隆抗体为北京中杉金桥生物技术有限公司产品;激光共聚焦检测用cy3标记 (红色)羊抗单克隆抗体及FITC标记 (绿色)驴抗单克隆抗体均为Jackson Immuno Research公司产品。……