哈蟆油中免疫活性部位的提取工艺与药效学研究Δ

2012-08-29王微郑飞李霞张炜煜长春中医药大学长春130117

中国药房 2012年27期

王微，郑飞，李霞，张炜煜（长春中医药大学，长春130117）

哈蟆油为中国林蛙（Rana temporaria chensinensisDavid）雌蛙的干燥输卵管，又称“林蛙油”。该药是2010年版《中国药典》收载品种，具有补肾益精、养阴润肺之功效；用于治疗阴虚体弱、神疲乏力、心悸失眠、盗汗不止、痨嗽咳血[1]。有研究表明，蛋白质被水解成小分子的肽类或游离氨基酸后，更易被人体快速和多途径吸收[2～4]。蛋白质可用酶法或酸法水解分离出，但酶法水解蛋白质较酸法水解作用温和且条件容易控制。因此笔者对哈蟆油中有效部位，即蛋白质采用酶法进行提取，并通过药效学实验验证其免疫调节作用，为哈蟆油的临床应用提供理论基础。

1 仪器与材料

1.1 仪器

JA5103N型电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）；RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；KQ2200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；pHS-25C型数字酸度剂（上海鹏顺科学仪器有限公司）；HHS21-Hi6电热恒温水浴锅（北京市长源实验设备厂）；DZF-6050型真空干燥箱（上海一恒科技有限公司）；E53042432型移液器（日本Nichirtyo公司）；WFH-203J型三用紫外-可见分析仪（上海精科实业有限公司）。

1.2 试药

哈蟆油为中国林蛙（中国林蛙购自吉林省桦甸市苏密沟林场，经长春中医药大学姜大成教授鉴定为真品）雌蛙蛙体干燥后剥取的输卵管，真空30℃烘干后，粉碎机粉碎，过100目筛，－5℃冰柜贮藏；环磷酰胺（浙江海正药业股份有限公司，批号：20100103）；木瓜蛋白酶（北京鼎国生物技术有限责任公司，批号：98010420）；氢氧化钠、硫酸铜、盐酸、硫酸钾、硫酸、甲醛均为分析纯。