曾嘉梅，房 栋，卞学兵，王俊桦，颜 焰，周继勇,2

（1.浙江大学 农业部动物病毒学重点实验室，杭州 310058;

2.浙江大学 传染病诊治国家重点实验室，杭州 310003）

禽流感病毒（Avain influenza virus, AIV）属于正粘病毒科、流感病毒属、A型流感病毒，基因组为8节段单股负链RNA。根据禽流感病毒囊膜表面糖蛋白HA和NA抗原性的不同，可将禽流感病毒分为16个HA亚型和9个NA亚型[1,2]。基因重组是流感病毒逃脱宿主已经获得的免疫从而造成流行的重要方式，如1957年（A/H2N2）、1968年（A/H3N2）、1997年（A/H5N1） 和 2009年（A/H1N1）的流感大爆发[3-5]，而流感病毒的混合感染是实现其基因重组的有效途径，不同亚型的流感病毒共同感染同一个宿主，它们在复制增殖时基因组可发生片段交换，从而产生出致病力不可预测的新型病毒，为流感病毒的大流行提供可能。

近年来，国内外多次报道流感病毒混合感染人的病例，但家禽混合感染事件报道甚少，本研究旨在分析免疫鸡群H5N1和H9N2亚型禽流感病毒混合感染后基因组变化，以了解混合感染中有无分子特征的改变，为预防和控制禽流感的流行提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 SPF鸡胚与标准血清 SPF种蛋购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司；鸡H5N1高免血清（HI=9log2）由中国农科院哈尔滨兽医研究所陈化兰研究员馈赠；其他H1～H13标准阳性鸡血清由中国农业大学动物医学院刘金华教授惠赠。

1.2 病料来源 病死鸡肺组织来源于浙江省余姚市禽病防治研究所。调查中，鸡群发病前免疫接种针对H5N1禽流感病毒的Re-4和Re-5疫苗及针对H9N2病毒的F株疫苗，三免后鸡群H9N2和H5N1抗体水平均高于6log2。……