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利用RAPD技术构建四倍体苜蓿遗传连锁图谱

2012-08-20刘曙娜于林清周延林吉仁花陈世茹孙娟娟么婷婷

草业学报 2012年1期

刘曙娜,于林清,周延林,吉仁花,陈世茹,孙娟娟,么婷婷

(1.内蒙古大学生命科学学院,内蒙古 呼和浩特010021;2.中国农业科学院草原研究所,内蒙古 呼和浩特010010;3.内蒙古农业大学林学院,内蒙古 呼和浩特010019;4.内蒙古农业大学农学院,内蒙古 呼和浩特010019;5.东北师范大学植被生态教育部重点实验室,吉林 长春130024)

苜蓿(Medicago)属豆科多年生草本植物,是世界上分布、栽培面积广,适应性广泛,品质优良的牧草。具有产草量高、品质优良、适口性好的特点,有很高的农业价值和商业价值。由于栽培苜蓿的同源四倍体特性使得其连锁图谱的构建相对困难。目前,公认的已发表四倍体苜蓿连锁图共有3个,Brouwer和Osborn[1]利用2个回交群体各101株个体,以单剂量位点(SDAs)方法将88个RFLP(restriction fragment length polymorphism,限制性内切酶片段长度多态性)标记构成7个连锁群,总遗传距离为443cM,饱和度相对较低。Julier等[2]利用168个F1杂交重组群体构建了遗传距离为2 649cM的父本连锁图谱和遗传距离为3 045cM的母本连锁图谱,同时利用SSR(simple sequence repeat,简单重复序列)标记构建了遗传距离为709cM 的整合图谱。Musical等[3]利用 AFLP(amplified fragment length polymorphism,扩增片段长度多态性)和 RAPD(random amplified polymorphic DNA,随机扩增多态性)标记构建了四倍体苜蓿遗传图谱。Eujayl等[4]于2005年利用来自紫花苜蓿(M.sativa)×黄花苜蓿(M.falcata)的F1回交群体,以EST(expressed sequence tag,表达序列标签)-SSR、SSR(SSR的分子标记代替首例图谱中的88个RFLP)构建了比较饱满的遗传图谱,总遗传距离为624cM。构建苜蓿分子遗传图谱可以进行目的基因的连锁分析、定位重要农艺性状相关基因位点(QTL)及分子标记辅助育种(molecular marker assisted selection,MAS)[5]。由于苜蓿遗传图谱共享机制不完善和我国苜蓿种质资源群体的独特性,构建拥有自主产权的苜蓿遗传图谱成为首要任务。……

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