罗正凯，王金环，孙凤，雍延礼，孙伟正

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

再生障碍性贫血(AA)作为一种造血负调控亢进“模型”，是一种危害性极大的血液系统疑难病症。CAA病理机制主要有造血干细胞量和质异常、免疫异常、造血微环境损伤等三个学说。本课题组经过近40年的连续研究，了解和认识慢性再障肾虚病机以及补肾药物疗效机理和环节［1－2］。受体配体结合时引起的细胞内信号转导通路的变化可能为其重要机理之一。钙离子(Ca2+)通路作为重要的信号转导通路基本上可参与到CAA各个环节当中。本实验搜集CAA患者骨髓样本，采用流式细胞术(FCM)拟通过对患者骨髓单个核细胞内Ca2+浓度测定，以期进一步探讨补髓生血颗粒对慢性再障的治疗机制。同时观察不同血液疾病患者骨髓单个核细胞内Ca2+浓度水平，为血液疾病的诊断和治疗提供新的思路。

1 研究对象

本次观察研究对象共纳入CAA患者55例，均来源于黑龙江中医药大学附属第一医院血液内科2010年1月～2011年3月期间住院或门诊治疗的CAA患者，随机分为治疗组和对照组，治疗组55例，其中肾阳虚型30例，肾阴虚型25例;对照组53例。治疗组予以补髓生血颗粒治疗，对照组则予以再造生血片治疗。另选取30例健康体检志愿者作为正常对照组。

2 研究方法

依照文献［3］所述方法，使用淋巴细胞分离液分离骨髓单个核细胞。依照Fluo－3－AM(进口自美国intrigen公司)试剂盒所述方法对BMMC内Ca2+染色，将已分离完毕的BMMC分为A、B两管，在A管中加入D－PBS，B管中加入 Fluo－3AM荧光素，避光孵育1h。……