马开峰 张志毅 王斯琪 宋跃朋 张德强

(林木育种国家工程实验室(北京林业大学)，北京，100083)

DNA甲基化是基因组的一种主要的表观遗传修饰形式，指由Dnmt催化并以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体发生催化反应，产生N-甲基腺嘌呤、N-甲基胞嘧啶和C-甲基胞嘧啶的现象［1］。在真核生物中，DNA甲基化主要以5-甲基胞嘧啶的形式存在［2-3］。正常情况下，植物基因组DNA中约20%～30%的胞嘧啶残基发生甲基化，其中绝大部分的甲基化位于CpG二核苷酸和CpNpG三核苷酸对中［4-7］，并在植物基因表达调控、外源基因防御、个别基因表达模式的遗传等途径中起着重要的作用［8-9］。 Methylation-sensitive Amplified Polymorphism(MSAP)是在AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)基础上发展起来的一种分子标记技术，操作相对简便，同时不需知道被检测DNA的序列信息，即可在全基因组范围检测5’-CCGG位点的胞嘧啶甲基化变化，在不同生物上具有通用性［10-22］。该技术作为检测胞嘧啶甲基化的手段始见于Reyna-López等［10］检测二形真菌基因组 DNA甲基化，之后被广泛用于玉米［11-12］、水稻［13-14］、棉花［15-16］、油菜［17］等作物中。在林木中，研究者利用该技术对落叶松［18］、苹果［19］、甜桔栽培种［20］、红树［21］、杉木［22］等树种基因组 DNA 甲基化进行了研究，并认为基因组甲基化与林木体胚发生、生物量及杂种优势密切相关。

毛白杨(Populus tomentosa Carr.)是我国特有白杨派树种，它分布广，速生，适应性和抗性强，材质优良，是华北平原营造人工丰产林和农田防护林的重要树种［23］。因此，在表观遗传学领域对其进行研究具有重要意义，但目前研究毛白杨基因组DNA甲基化的实例尚未见报道。本实验首次将……